- 面议
起订量：
BC0860-50T/24S 土壤酸性蛋白酶活性检测试剂盒
- 型号
- BC0860-50T/24S
该企业相似产品
北京索莱宝科技有限公司
（Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. ）是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。
总部位于北京，并在设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及的仓储和物流系统。“Solarbio”已经得到科研工作者的认可，成为广大经销商推崇的。
公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，索莱宝公司提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，索莱宝谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买索莱宝产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
索莱宝公司坚持与接轨，注重和企业的合作与交流，并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多合作，不断为广大生物科研工作者提供更优质的产品和服务。公司理念：“为科研服务，为生命尽责”。一个人能够走多远，取决于与谁同行。索莱宝公司期待与各同行精诚合作。
索莱宝诚招生物试剂研发人员，期待与广大同行精诚合作，为广大科研工作者提供优质的产品，高效的物流以及专业的售后服务。索莱宝感谢所有朋友的支持与帮助，您的支持是我们前进的动力和保障。让我们携手同行，共同创造美好的明天。
详细信息
土壤酸性蛋白酶活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0860
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 液体40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂五 | 液体10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂六 | 液体15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
试剂二：临用前加入10 mL试剂六，沸水浴搅拌溶解后待用，用不完的试剂2-8℃保存1个月。
标准品：20μmol/mL 酪*酸溶液。
产品说明：
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。土壤酸性蛋白酶在酸性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。酸性条件下，土壤酸性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪*酸；在碱性条件下，酪*酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝，在680nm有特征吸收峰。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、台式离心机、研钵、蒸馏水、30-50目筛。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
二、测定步骤
分光光度计预热30min 以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。
标准溶液的稀释：取10μL 20μmol/mL酪*酸标准液，加入990μL蒸馏水，充分混匀，配制成0.2μmol/mL标准液使用，现用现配。（实验中每管需要220μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
样本测定
| 试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
| 风干土样（g） | 0.1 | 0.1 | - | - |
| 试剂一（μL） | 200 | 200 | - | - |
| 试剂二（μL） | 100 | - | - | |
| 充分混匀后，37℃水浴/恒温培养箱中反应24h，期间振荡5-6 次，使土样与反应液充分接触。 | - | - | ||
| 试剂三（μL） | 200 | 200 | - | - |
| 试剂二（μL） | - | 100 | - | - |
| 混匀，10000rpm 室温离心10min，取上清液待测 | - | - | ||
| 上清液（μL） | 220 | 220 | - | - |
| 0.2μmol/mL标准液（μL） | - | - | 220 | - |
| 蒸馏水（μL） | - | - | - | 220 |
| 试剂四（μL） | 650 | 650 | 650 | 650 |
| 试剂五（μL） | 130 | 130 | 130 | 130 |
| 混匀，40℃水浴或恒温培养箱培养10min，10000rpm室温离心10min，取上清液于680nm下读取各管吸光值A，分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管，计算ΔA测定=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。（标准管、空白管只需测1-2次，每个测定管需设一个对照管） | ||||
三、土壤酸性蛋白酶活性计算
单位定义：每天每g土样中产生1μmol的酪*酸为一个土壤酸性蛋白酶活力单位。
土壤酸性蛋白酶(U/g 土样)=C标准×ΔA测定÷ΔA标准×V反总÷W÷T=0.1×ΔA测定÷ΔA标准÷W
C标准：标准管浓度，0.2μmol/mL；V反总：反应体系总体积，0.5mL；T：反应时间，1d；W：样本质量，g。
注意事项：
当吸光值大于1时，建议将上清液用蒸馏水稀释后进行测定，计算时注意乘以稀释倍数。
实验实例：
分别称取2份0.1g土样于1.5mLEP管中，分别为对照管及测定管。按照测定步骤操作，使用1mL玻璃比色皿测定吸光度，计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.206-0.178=0.028，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.540-0.028=0.512，按土壤质量计算酶活得：
土壤酸性蛋白酶(U/g 土样)= 0.1×ΔA测定÷ΔA标准÷W= 0.1×0.028÷0.512÷0.1= 0.0547U/g土样。
分别称取2份0.1g三叶草土样于1.5mLEP管中，分别为对照管及测定管。按照测定步骤操作，使用1mL玻璃比色皿测定吸光度，计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.831-0.612=0.219，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.540-0.028=0.512，按土壤质量计算酶活得：
土壤酸性蛋白酶(U/g 土样)= 0.1×ΔA测定÷ΔA标准÷W= 0.1×0.219÷0.512÷0.1=0.0313 U/g土样。
相关系列产品：
BC0270/BC0275 土壤中性*白酶活性检测试剂盒
BC0880/BC0885 土壤碱性蛋白酶（S-ALPT）活性检测试剂盒
土壤酸性蛋白酶活性检测试剂盒
