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BC0480-50T/24S 土壤FDA水解酶活性检测试剂盒
- 型号
- BC0480-50T/24S
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北京索莱宝科技有限公司
（Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. ）是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。
总部位于北京，并在设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及的仓储和物流系统。“Solarbio”已经得到科研工作者的认可，成为广大经销商推崇的。
公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，索莱宝公司提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，索莱宝谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买索莱宝产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
索莱宝公司坚持与接轨，注重和企业的合作与交流，并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多合作，不断为广大生物科研工作者提供更优质的产品和服务。公司理念：“为科研服务，为生命尽责”。一个人能够走多远，取决于与谁同行。索莱宝公司期待与各同行精诚合作。
索莱宝诚招生物试剂研发人员，期待与广大同行精诚合作，为广大科研工作者提供优质的产品，高效的物流以及专业的售后服务。索莱宝感谢所有朋友的支持与帮助，您的支持是我们前进的动力和保障。让我们携手同行，共同创造美好的明天。
详细信息
土壤FDA水解酶活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0480
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
标准品 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂二：临用前取1支加1.5 mL丙酮溶解，用不完的-20℃分装保存一周，避免反复冻融；
2、 标准品：10 mg荧光素，临用前加入3.03 mL 50%丙酮（丙酮（V）：蒸馏水（V）=1:1）配成10 μmol/mL的荧光素标准溶液，可45℃水浴促进溶解，-20℃分装保存两周，避免反复冻融。
产品说明：
FDA水解反应能很好的反应土壤中微生物活性和土壤质量的变化以及生态系统中有机质的转化，是土壤质量研究中的重要生物学指标之一。
FDA是一种无色化合物，在介质中能被许多土壤酶所催化水解，并经脱水反应，产生酶解终产物荧光素，稳定不易被分解，并在490nm处有强吸收峰，通过检测490nm处的吸光值变化可计算得FDA水解酶活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、天平、台式离心机、恒温水浴锅/恒温培养箱、丙酮（不可快递）、研钵、30-50目筛。
三、FDA水解酶活性计算
酶活性定义：每克土壤每天产生1μmol 荧光素的量为一个酶活力单位。
FDA活性（U/g 土样）=（ΔA测定÷ΔA标准×C标准品）×V反总÷W ÷T=48×（ΔA测定÷ΔA标准）÷W
C标准品：标准品浓度 2μmol/mL；V反总：反应总体积，1mL；W：样本质量，g；T：反应时间，1h=1/24d。
注意事项：
1. 尽量采用新鲜土样或者短期低温保存样本，否则很难准确反映酶的活性。
2. 测定之前进行预实验，若吸光值大于1.2，可适当减少土样质量再测定。若吸光值过小，可增加土样质量或增加反应时间来进行测定。
实验实例：
1、 分别取两管0.1g三叶草土于1.5mLEP管中，分别为对照管及测定管，按照测定步骤操作，取上清稀释5倍进行测定，用1mL玻璃比色皿测定吸光值，计算ΔA测定=A测定-A对照=1.148-0.066=1.082，ΔA标准=A标准-A空白=0.499-0=0.499，按土壤质量计算酶活得：
FDA活性（U/g 土样）=48×（ΔA测定÷ΔA标准）÷W×5（稀释倍数）= 5204.01 U/g 土样。
2、 分别取两管0.1g林土于1.5mLEP管中，分别为对照管及测定管，按照测定步骤操作，取上清稀释5倍进行测定，用1mL玻璃比色皿测定吸光值，计算ΔA测定= A测定-A对照=0.973-0.133=0.84，ΔA标准=A标准-A空白=0.499-0=0.499，按土壤质量计算酶活得：
FDA活性（U/g 土样）=48×（ΔA测定÷ΔA标准）÷W×5（稀释倍数）= 4040.08 U/g 土样。
参考文献：
[1] Sánchez-Monedero M A, Mondini C, Cayuela M L, et al. Fluorescein diacetate hydrolysis, respiration and microbial biomass in freshly amended soils[J]. Biology and Fertility of Soils, 2008, 44(6): 885-890.
[2] Paudel B R, Udawatta R P, Anderson S H. Agroforestry and grass buffer effects on soil quality parameters for grazed pasture and row-crop systems[J]. Applied Soil Ecology, 2011, 48(2): 125-132.
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