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细胞形态观察服务
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上海达为科生物科技有限公司，位于上海长江软件园，公司目前具备较好的生物学、医学技术服务平台，能够为广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产服务。
公司拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员（博士后）2人，助理研究员（博士）4人，核心研究员（硕士）15人，主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。通过高度细分、较好的服务平台，为广大客户提供了完善的技术解决方案和服务。目前，，涉及临床医学、肿瘤生物学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学、医学等诸多领域。
我们的目标是为了使您的工作更轻松、更快捷。为了实现一站式服务我们不断更新实验方法和引进新的产品，控制和降低各种成本，为您的研究加油。这既是一项长期而艰巨的工作，又是一项光荣的工作，同时也是我们企业发展的动力源泉。
详细信息
（一）倒置显微镜下直接观察细胞形态
细胞形态变化包括：细胞核、细胞膜和细胞质的改变，即细胞是否有空泡积累和脂质小滴、是否可见细胞膜膨出（鼓泡）、细胞核染色质的变化以及细胞器如线粒体、溶酶体等的变化、细胞脱壁和贴壁、细胞膜表面是否毛糙无光泽、细胞是否裂解为碎片等。通过细胞形态的这些变化，可直观快速地判断细胞毒性。
（二）透射电子显微镜观察
【材料】
1. 2％～3％琼脂糖。
2. 2％～2.5％戊二醛。
3. 1％四氧化*。
4. 0.2M PBS缓冲液。
5．梯度丙酮。分别为50%,70%,90%,100％浓度的丙酮。
【方法】
1．收集对数生长期的培养细胞5x107左右。将细胞连同培养液放入2ml的离心管中，然后用PBS清洗2～3次，1000～1500r/min离心样品5～10分钟，吸去上清液，混匀细胞。
2．沿管壁小心加入2％～2.5％的冷戊二醛，轻轻吹打，使细胞混匀。在4℃的环境中固定30分钟，然后用指弹法将细胞团块弹散，继续用新的固定液固定细胞30分钟。1000r/min离心5分钟，弃上清液。
3．在4℃下用PBS冲洗后放置1～2小时或者过夜，离心后弃上清液。
4．管内加入0.1～0.5m1 37℃的2％～4％的琼脂糖液，混匀并冷却，形成细胞琼脂凝胶预包埋块。
5．离心管中加入少量的PBS或者75％的乙醇，用铝片沿管壁小心地将细胞琼脂糖松动，预包埋块移到含有75％乙醇的青霉素瓶中，一天后换固定液一次。4℃保存。
6．将预包埋块切成1 mm3大小，放到1％四氧化*中4℃固定1～ 2小时。用PBS反复漂洗后放置30分钟或过夜。
7．分别用50%,70%,90%,100％的丙酮脱水一次，每次10～15分钟；然后100％丙酮脱水3次，每次30分钟。
8．浸入稀释包埋剂（丙酮：包埋剂=1:1)中，室温1小时。再放到纯包埋剂中，37℃过夜。然后60℃固定48小时。放置于干燥器中备用。
9．将样品放到电子显微镜进行透视观察。
（三）扫描电子显微镜观察
培养细胞电镜扫描观察非常方便；在观察铁壁细胞时也需要进行消化，制备成细胞悬液后，用Hanks液漂洗1到2次后，除去细胞碎块和血清蛋白，以防妨碍观察。
【材料】
1. 1.5％戊二醛。
2. 0.2M PBS缓冲液。
3. 50%,70%,90%,95%,100％的梯度乙醇。
4. 1％四氧化*（Os04)。
5．丙酮。
【方法】
1．单层细胞盖玻片培养物冷漂洗后，用1.5％戊二醛4℃固定1～2小时。PBS液清洗3次，每次10分钟。
2．在4℃下用1 % OSO4固定1小时，然后用PBS缓冲液清洗3次，每次10分钟。
3．分别用50%,70%,90%,95%,100％的乙醇依次脱水，每个浓度的乙醇脱水2次，每次15分钟。
4. 100％丙酮脱水3次，每次30分钟。
5．将标本在4℃下用丙酮保存。
6．用扫描电子显微镜观察。
