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同源抗体荧光三标试剂盒
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同源抗体荧光三标试剂盒
原理:利用二抗标记的 HRP,催化 TYR 荧光探针反应结合至抗原蛋白周围分子上,性共价标记蛋
白上,运用 HRP 二抗及一抗在微波热修复条件下脱离掉抗原失活的原理,重复此过程,即可实现同
种属荧光双标及荧光三标以及多标(备注:此过程仅适合石蜡切片的荧光多标)。此试剂盒中的荧光
探针可单独或配合使用。可以实现单标、双标、三标或荧光放大等功能,极大丰富了此试剂盒的内涵。
试剂盒组成:TYR-488 反应液(绿光)(5mL),-20℃;TYR-CY3 反应液(红光)(5mL),-20℃;TYR-CY5
反应液(5mL),-20℃ 高敏多聚 hrp 山羊抗兔二抗(需自备) 4℃。
备注:TYR-488 反应液/TYR -CY3 反应液/TYR-CY5 反应液在-20 度下 ,均为固体, 使用之前需解冻。
操作流程:
1 对于石蜡切片,脱蜡至水。
2 合适的抗原修复液修复(修复类型必须为抗原热修复),3%H2O2 封闭,2%BSA-PBS 封闭,孵育一
抗,孵育 HRP 二抗。加入 50-200ul/ TYR-488/TYR -CY3/TYR-CY5 反应液反应,室温反应10~15min.
3 重复步骤 2
4 三标完成后,染 dapi 细胞核。
5 防荧光淬灭封片剂封片。
6 选择合适激发吸收波长通道荧光拍照