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猪蓝耳病毒抗体ELISA检测试剂盒使用说明书
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山东蓝都生物科技有限公司成立于2015年，秉承“品质至上、客户第一、追求ZHUOYUE”的生产服务宗旨，“自强不息、艰苦奋斗、务实创新、追求ZHUOYUE”的精神，不忘初心，目标坚定，做BEST产品，服务于行业客户。食品安全检测事业部现有保健品类、激素及类固醇类、重金属类、喹恶啉类、消炎镇痛类、水产违禁类、牛羊马类、农药DU品类、禽病类、生理活性物、体外诊断IVD炎症、细菌含传染病类等多个品种。
主要产品有真菌毒素免疫亲和柱、真菌毒素嵌合酶联免疫检测试剂盒、真菌毒素胶体金定性检测卡、量子点定量检测卡、食品安全定量/定性检测箱、食品安全抗原及单克隆抗体、单克隆及多克隆抗体制备试剂耗材及相关仪器、食品安全与动物疫病类抗原及单克隆抗体等约1200种，部分产品已经出口到德国、俄罗斯、伊朗、英国、美国等多个国家。
地址：山东省滨州市国家经济技术开发区黄河二路376号
邮编：256600
详细信息
猪蓝耳病毒抗体ELISA检测试剂盒使用说明书
Service manual of ELISA Kit for PRRS Virus antibody
【产品简介】猪蓝耳病（PRRS）是一种高致病率、高死亡率的病毒病，给国内养猪业造成巨大的损失。在免疫预防工作中，接种了疫苗后，由于多种因素可能导致猪不产生或产生低水平蓝耳病病毒抗体。
本试剂盒采用酶联免疫吸附试验检测猪血清中PRRSV抗体，用于免疫疫苗后抗体动态水平监测，指导免疫预防工作，评估猪场蓝耳病免疫状况，也可用于蓝耳病的流行病学调查。
【猪蓝耳病毒抗体ELISA检测试剂盒使用说明书产品内容】
试剂盒主要成分 | 数 量 |
抗原包被板（PRRSV） | 96T×1 |
阳性对照 | 1ml×1 |
阴性对照 | 1ml×1 |
酶标结合物 | 20ml×1 |
样品稀释液 | 50ml×1 |
底物液 | 20ml×1 |
终止液 | 15ml×1 |
20×浓缩洗涤液 | 50ml×1 |
封口胶 | 2份 |
使用说明书 | 1份 |
【成分性状】
包被板 | 96孔塑制微孔板，无色透明，干燥，无杂质吸附 |
酶标结合物 | 略带黄色澄明液体 |
阴、阳性对照 | 略带黄色澄明液体 |
样品稀释液 | 略带黄色澄明液体 |
浓缩洗涤液 | 无色或略带黄色的澄明液体 |
底物液 | 无色或微蓝色澄明液体 |
终止液 | 无色澄明液体，低温条件下可能会出现絮状沉淀 |
【用法与判定】 按以下步骤进行：
1、需要自备的器材
1.1 微量移液器；
1.2 微量移液器配套使用的枪头；
1.3 用来稀释洗涤液的500ml量筒；
1.4 适用于检测96T微孔板的酶标仪；
1.5 用于稀释样品的1.5ml Ep管；
1.6 蒸馏水或去离子水。
2、样品的制备
用样品稀释液将待检血清样品进行50倍稀释(建议：4μl血清样品加入196μl样品稀释液中)，样品加入包被板前要充分混匀，稀释不同待检样品注意更换枪头。注意：①制备血清用的血液样本应无溶血现象发生；②不能稀释阴性、阳性对照。
3、操作步骤 （﹡使用前应轻轻旋转或震荡予以混匀，所有试剂应恢复至室温）
3.1 在A1和A2孔中分别加入100μl阴性对照；
3.2 在A3和A4孔中分别加入100μl阳性对照；
3.3 取100μl稀释好的待检样品加入相应孔中，并做好记录；
3.4 37℃孵育30min；
3.5 将各孔的液体弃入废液桶，每孔加250μl的洗涤液（试剂盒内20×浓缩洗涤液需用蒸馏水或去离子水稀释后方可使用。如有结晶，需先溶解后，方可进行稀释）进行洗板，重复5次，每次30s；
﹡加液时防止各孔间洗涤液串流影响检测结果，尽量将孔内洗涤液抛甩干净；
3.6 每孔加100μl酶标结合物；
3.7 37℃孵育30min；重复步骤3.5；
3.8 每孔加100μl底物液；
3.9 37℃孵育10min（避光显色）；
3.10 每孔加50μl的终止液；
3.11 立刻于450nm波长处测定各孔的吸光度值，即OD450值。
4、试验有效性判断
4.1阴性对照：正常情况下，阴性对照孔OD450值≤0.3；
4.2阳性对照：正常情况下，阳性对照孔OD450值≥0.6；
4.3临界值(C.O.)计算：临界值=0.18+阴性对照均值；阴性对照OD450值大于0.3时应舍弃，如所有阴性对照OD450值均大于0.3时须重复实验；阴性对照低于0.05时以0.05计算。
4.4结果判定： 检测样品OD450值≥临界值，判定该检测样品为阳性； 检测样品OD450值＜临界值，判定该检测样品为阴性。
【注意事项】
（1）待检血清样品数量过多时，应先使用血清稀释板将所有待检血清稀释完毕后，再统一将血清样品加入酶标板中，使反应时间一致。
（2）试剂盒使用的过程中不要吸烟、喝水和吃东西。
（3）底物液和终止液对皮肤有刺激性，注意防护。
（4）底物液不要暴露于强光和任何氧化剂；使用洁净的玻璃和朔料容器处理底物液。
（5）所有试剂应在2～8℃存放；使用前恢复到室温，使用后放回2～8℃。
（6）注意防止试剂盒组分受到污染。
（7）不要使用超过有效期的试剂，不同批次试剂盒的组分不要混用。
（8）操作过程中的移液、时间和洗涤必须精确。
【规格与包装】96T×2
【贮藏与有效期】2～8℃避光保存，有效期为12个月
仅供兽医诊断使用
长期提供原核、真核蛋白表达构建服务
长期 提供抗原偶联、 HRP、生物素、糖基化、亲和素、FITC等偶联标记多肽、抗体、抗原、蛋白等服务
