其他自备材料和试剂

MG&ABW基质胶

组织消化液

上皮类器官基础培养基

类器官消化液

人肝胆管(扩增)类器官培养基

类器官冷冻保存培养基(无血清)  

DPBS (1X)，液体，不含钙和镁  

FBS（胎牛血清）

EDTA

人肝胆管类器官扩增培养基和稳态培养基的制备

采用无菌技术制备人肝胆管类器官扩增培养基和稳态培养基。在人肝胆管类器官扩增培养基中生长的人肝导管类器官绝大多数是胆管细胞。

以下是准备 10mLcomplete medium培养基的示例，如所需量不同，可相应调整用量。

1.冰上解冻人肝胆管类器官培养因子B、人肝胆管类器官培养因子C。

注意： 解冻后，建议将人肝胆管类器官培养因子B、人肝胆管类器官培养因子C分别分装后保存取用，避免反复冻融。

2. 配制人肝胆管类器官扩增培养基，专门用于原代培养和复苏。添加200 μL人肝胆管类器官培养因子B (50x)、40 μL人肝胆管类器官培养因子C (250x)至9.76 mL人肝胆管类器官基础培养基中，混合均匀。

注意：配制后的人肝胆管类器官培养基可在 2-8°C 储存，建议在两周内使用。人肝胆管类器官培养因子B(50x)内含有细菌及真菌抗生素(50x)。