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光谱仪和分光光度计

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参数
产地类别:进口 价格区间:面议 应用领域:医疗卫生,环保,食品,化工,综合
北京博奥聚合科技有限公司

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京博奥聚合科技有限公司是一家分析仪器的销售及系统服务公司,主要为客户提供从通用基础仪器到大型进口实验室仪器以及实验室消耗品。产品广泛应用于制药、机械、化工、电子、市政以及高校、研究院所等科研机构。

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    博奥聚合的愿景是:以我们的系统服务,为您打造一个轻松、便捷、舒适的实验环境。







 

详细信息

仪器概况

       光谱仪(spectrometer)和分光光度计(Spectrophotometer),是将成分复杂的光分解为光谱线的科学仪器。

       当光线通过某种物质的溶液时透过的光的强度减弱,因为有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光 被组成此溶液的物质所吸收,只有一部分光可透过溶液。因此:

入射光=反射光+分散光+吸收光+透过光。

如果我们用蒸馅水(或组成此溶液的溶剂)作为“空白”去校正反射,分散等因素造成的入射光的损失,则 出现:

入射光=吸收光十透过光。

        不同的光源都有其发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。不同物质都有特定的吸收光谱,根据溶液的吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质成分。

        钙灯发射光谱:鸨灯光源所发出380〜780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、 蓝、靛、紫组成的连续色谱,该色谱可作为可见光分光光度计的光源。

        氢灯(或笊灯)发射光谱:氢灯(或気灯)能发出185-400nm波长的光谱,可作为紫外光光度计的光源。

常用的波长范围包括:

(1)     200〜380nm的紫外光区;

(2)     380~780nm的可见光区;

(3)     2.5〜25卩m (按波数计为4000/®米〜400/厘米)的红外光区。

       用于测量200〜380nm的紫外光区物质吸光度的仪器为紫外分光光度计;

       用于测量380〜780nm的可见光区物质吸光度的仪器为可见光分光光度计(或比色计):

       用于测量2.5〜25〃 m (按波数计为4000/厘米〜400/厘米)的红外光区物质吸光度的仪器为红外分光光度计 或原子吸收分光光度计。

工作原理

       光谱仪和分光光度计釆用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源, 光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品 的浓度成正比。

       单色光辐射穿过被测物质溶液吋,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比, 其关系如下式:

A=-lg(I/Io)=-lgT=kLc

式中:A为吸光度:Io为入射的单色光强度;1为透射的单色光强度:T为物质的透射率;k为摩尔吸收系数; L为被分析物质的光程,即比色皿的边长;c为物质的浓度;

 

仪器用途

1.    核酸的定量

       核酸定量是紫外光谱仪和紫外分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核昔酸,单链、 双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260nm。

        除了核酸浓度,光谱仪和分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如A260/A280的比值, 用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nmo

       纯净的样品,比值大于1.8 (DNA)或者2.0 (RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类 物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比 值大于2.0。A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品,A320一般是0。

2.    蛋白质的直接定量(UV法)

       这种方法是在280nm波长直接测试蛋白,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法, 将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存 在一些杂质,一般要消除320nm的“背景”信息。

3.    比色法蚩白质定量

       蛋白质通常是多种蛋白质的混合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸) 与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反映的氨基酸数目直接相关,从而 反映蛋白质浓度。比色方法一般有BCA、Bradford、Lowry等儿种方法。

4.    细菌细胞密度(OD 600)

       实验室确定细菌生长密度和生长期,多根据经验和目测推断细菌的生长密度。在遇到要求较高的实验,需要 釆用分光光度计准确测定细菌细胞密度。OD600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。以未加菌液的培养 液作为空白液,之后定量培养后的含菌培养液。

5.    海洋学研究中痕量物质浓度

       WPI公司设计长光程液态样本流通池(LWCC)具有50、100、250和500不同的光程可以选择。因此,不同 光程长度的LWCC配合适的光源和检测器,常用于海洋学应用中营养物分析的流体注射分析系统(如硝酸盐、 亚硝酸盐、磷酸盐和铁离子检测等)。海水和淡水中CDOM (有色溶解有机物含量)的检测,因为海水中CDOM的 含量极低(0.007m-l)。

6.    大气环境中超低含量物质浓度

      大气中的SO2、硝酸盐、亚硝酸盐、羟基、棕碳、黑碳、水溶性铁、气溶胶等含量很低,使用普通的分光光 度计很难检测出来。将大气中釆集的样本液态化,再配合不同光程的LWCC进行检测,可以将这些含量极低的 物质加以检出。


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