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细胞3D打印机:解冻细胞

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应用领域:医疗卫生,食品,生物产业,农业,制药
世联博研(北京)科技有限公司

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详细信息

细胞3D打印机:解冻细胞

概述

正确解冻细胞对细胞培养健康至关重要。通常,特定的细胞系将具有制造商提供的特定解冻方案。这是解冻细胞的一般方案,不附带制造商的解冻方案。请注意,不遵循制造商的说明可能会导致细胞死亡或功能不正常。

材料

  • 冻存细胞瓶

  • 细胞培养基

  • 组织培养瓶

  • 水浴/珠浴 (37°C)

  • 70%乙醇

  • Kimwipes

  • 生物安全柜 (BSC)

  • 培养箱(37°C,5% CO2)

  • 自动移液器进样器

  • 血清移液管

  • 微量移液器

  • 微量移液器吸头

方法

  1. 在水/珠浴中将细胞培养基加热至 37°C;

  2. 请记住用 70% 乙醇喷洒所有东西,并在进入 BSC 之前用 Kimwipes 擦拭;

  3. 检查冷冻保存小瓶中的细胞数量,并用相应量的温细胞培养基制备适当数量的烧瓶。细胞接种密度因每种细胞类型而异,但通常为 2,000-5,000 个细胞/厘米2.培养基量也因烧瓶大小而异,但建议每厘米使用 0.2 mL 培养基2.在下面找到有用的公式;

  • 烧瓶数 = 细胞数/细胞接种密度/烧瓶面积(厘米)2

  • 介质量 =(烧瓶面积,单位为厘米2)*0.2 毫升

  1. 从液氮中取出细胞瓶,将其浸入水/珠浴中直至盖子不超过 2 分钟;

  2. 当小瓶的侧面解冻但其中心保持冻结时取出小瓶;

  3. 喷洒所有培养基和移液管,并将它们移入 BSC;

  4. 将 1 mL 培养基移液到细胞瓶中;

  5. 上下移液器溶液,确保细胞分布均匀;

  6. 将相应量的细胞溶液移液到每个含有细胞培养基的烧瓶中。使用以下公式计算每个烧瓶中要添加多少细胞溶液;

  • 接种细胞溶液量 = 细胞溶液体积/培养瓶数

  1. 轻轻摇晃烧瓶,不要让溶液接触过滤器盖。如果过滤器与液体接触,无菌屏障可能会被破坏,并且您可能已将细胞培养物暴露于外部病原体;

  2. 给烧瓶贴上标签。好包括以下信息;

  • 您的姓名字母和通过日期(例如:如果您的姓名字母是 YN,日期是 MM/DD/YYYY,请将其标记为 YNYYYMMDD)

  • 细胞系和传代数(如果您的小瓶是 Pn,它们现在将是 Pn+1)。

  1. 将烧瓶放入培养箱中;

  2. 按照此协议,每两到三天喂养一次细胞;

  3. 遵循此方案的传代细胞。

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细胞3D打印机:解冻细胞

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应用领域 医疗卫生,食品,生物产业,农业,制药
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