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兔肾素(Renin)ELISA检测试剂盒现货价格

上海酶远生物科技有限公司

2017/7/2 16:56:07

兔肾素(Renin)ELISA检测试剂盒现货价格

参数规格:

检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属

产品保存:2~8℃、有效期6个月

产品询价:您可以通过、邮件、传真或在线客户方式询价。

Elisa试剂盒应用:准确定性定量分析(但Elisa试剂盒只能供科研使用,不能作为临床诊断使用)

ELISA酶免试剂盒四大特性:

1.特异性强:不与其它细胞因子反应。

2.重复性好:板内、板间变异系数均小于10%。

3.稳定性高:实验效果很稳定。

4.超灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品,稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

主要优点:

一、、灵敏、特异的抗体;

二、稳定的重复性和可靠性;

三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;

五、zui大限度的节省实验经费。

兔肾素(Renin)ELISA检测试剂盒现货价格

操作流程:

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;

2. 加样(标准品及样本)100μL,37°C孵育1小时;

3. 吸弃,加检测溶液A100μL,37°C孵育1小时;

4. 洗板3次;

5. 加检测溶液B100μL,37°C孵育30分钟;

6. 洗板5次;

7. 加TMB底物90μL,37°C孵育15-25分钟;

8. 加终止液50μL,立即450nm读数。

工作原理:

将转化生长因子β2 (TGFb2)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的转化生长因子β2 (TGFb2)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的转化生长因子β2 (TGFb2)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β2 (TGFb2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。

兔肾素(Renin)ELISA检测试剂盒现货价格

ELISA标准操作及技术服务的常见问题分析:

.ELISA 标准操作要点

的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。ELISA 中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的本公司要求使用的纯化水电导率小于1.5μs/cm。

1. 标本的采取和保存

大部分ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP 为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。一般说来,在5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。抗凝不*的标本因纤维蛋白原的干扰而造成假阳性,建议尽量不用抗凝血尤其是肝素抗凝剂。

2.加样

加样时应将所加物加在ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出。

3.保温

在建立ELISA 方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经

1-2 小时,产物的生成可达。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,反应板不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。由于公司的试剂盒温育是在空气浴中完成,采用水浴会造成值偏高或花板。另外温育中还有边缘效应,边上的值会偏高,建议为了客观的判断结果,将质控放在非边缘位置。

4.洗涤

洗涤在ELISA 过程中虽不是一个反应步骤,但却决定着实验的成败。ELSIA 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA 操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。

洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。

洗板时注意各种试剂盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀释,应按要求稀释,所用的水电导率在1.5us/cm 之下,洗液如果结晶应待其融解后配制。保证洗板浸泡时间为40 秒左右,孔内液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好,手工洗板防止洗液在孔内形成气泡。

5. 显色和比色

TMB 经HRP 作用后,约40 分钟显色达,随即逐渐减弱,至2 小时后即可*消退至无色。TMB 的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24 小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。酶标比色仪简称酶标仪,通常指于测读ELISA 结果吸光度的光度计。酶标仪的主要性能指标有:测读速度、读数的准确性、重复性、度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可到0.001,准确性为±1%,重复性达0.5%。酶标仪不应安置在阳光或强光照射下,操作时室温宜在15~30℃,使用前先预热仪器15-30 分钟,测读结果更稳定。

测读A 值时,要选用产物的敏感吸收峰,如OPD 用492nm 波长。有的酶标仪可用双波长式测读,即每孔先后测读两次,*次在zui适波长(W1),第二次在不敏感波长(W2),两次测定间不 移动ELISA 板的位置,zui终测得的A 值为两者之差(W1-W2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

订购说明:

1. 明确检测何种蛋白;

2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性;

3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒;

4. 咨询上海酶远使用的抗体类型;

5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。

 

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