TMB底物显色试剂盒（可溶型）说明书
Soluble TMB Kit
目录号：K0050
保存条件：2-8℃保存。
组分说明
Cat No. K0050
Volume 100 ml
TMB 5 ml
TMB-显色液 100 ml
产品简介
TMB （3', 3', 5', 5', -四甲基联苯胺）是辣根过氧化物酶（HRP）的显色底物，是目
前HRP系统ELISA实验的常用显色试剂。TMB显色底物工作液在HRP的催化下，形成蓝色的阳离子产物，在370 nm和652 nm处有主要吸收峰。加酸终止反应后，蓝色转变为黄色，可以在450 nm波长下测定。本试剂盒使用方便，灵敏度高，效果稳定，颜色产物为可溶性，适用于ELISA，不推荐用于IHC实验。
本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及其他用途
注意事项
1．显色工作液应即用即配，放置超过10 min会影响显色效果。
2．TMB颜色底物显色后，随着时间的延长，颜色会逐渐消退，因此显色并终止反应后
应尽快读值，否则会影响检测的准确性。
3．以96孔酶标板每孔用量100 μl显色工作液计算，5 ml 20×TMB Kit 可完成1000孔样品的检测。
4．本产品仅限于科研，不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤
1．TMB显色工作液配制：
根据实验需用量，将TMB和TMB-显色液以1：19的比例均匀混合，即配制成为TMB显色工作液。
2．显色：
1）经HRP标记物孵育并充分洗涤后，酶标板每孔中加100 μl TMB显色工作液。
2）室温避光孵育25-30分钟，反应产物呈蓝色。
3）每孔加50 μl 0.5M H2SO4 终止显色，此时蓝色产物变为亮黄色。
4）将酶标板置于酶标仪中，450 nm波长下读取数据。
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