二手生物安全柜一般由箱体和支架两部分组成，箱体部分主要包含以下结构：空气过滤体系、外排风箱体系、滑动前窗驱动体系、照明光源和紫外光源。控制面板上有电源、紫外灯、照明灯、风机开关、控制前玻璃门移动等设备，能够在保护实验样品不受外界污染的同时，避免操作人员接触到实验操作过程中产生的有害或未知气溶胶和溅出物，被广泛应用于各级医疗机构检验科室、各级疾病/疫病预防控制中心、各类高等级安全实验室及各类制造企业。
二手生物安全柜是能防止实验操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱型空气净化负压安全装置。工作原理主要是将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来保护工作人员；外界空气经高效空气过滤器过滤后进入安全柜内，以避免处理样品被污染；柜内的空气也需经过过滤器过滤后再排放到大气中，以保护环境。其广泛应用于微生物学、生物医学、基因工程、生物制品等领域的科研、教学、临床检验和生产中，是实验室生物安全中一级防护屏障中基本的安全防护设备。
二手生物安全柜内操作主要注意事项：
1、缓慢移动原则：为了避免影响正常的风路状态，柜内操作时手应该尽量平缓移动。
2、不同样品柜内移动原则：柜内两种及以上物品需要移动时，一定遵循低污染性物品向高污染性物品移动原则，避免污染性高的物品在移动过程中产生对柜体内部的大面积污染。
3、物品平行摆放原则：为了避免物品和物品之间的交叉污染现象产生，在柜内摆放的物品应该尽量呈横向一字摆开，避免回风过程中造成交叉污染。同时避免堵塞背部回风隔栅影响正常风路。
4、明火使用原则：柜内尽量不要使用明火！因为在明火使用过程中产生的细小颗粒杂质将被带入滤膜区域，这些高温杂质会损伤滤膜。无法避免一定需要使用的时候，宜使用低火苗的本生灯。
5、避免震动原则：柜内尽量避免震动仪器(例如离心机、旋涡振荡器等)的使用，因为震动会使得积留在滤膜上的颗粒物质抖落，导致操作室内部洁净度降低，同时如果在前操作面平衡失败还会引起安全柜对操作者的污染。
