大鼠血清来源于非免疫的大鼠宿主，用脂质提取并用含有NaN3的PBS溶液透析以提高其透明度。建议用PBS将封闭血清原液稀释5-20倍，配制5%-20%的工作液，直接滴在组织切片或细胞涂片上，37℃孵育10-30分钟，取出血清无需洗涤，滴加适量稀释的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃过夜。注意：封闭血清不能含有目的蛋白，与一抗不同。可以使用与二抗来源相同的封闭血清。
大鼠血清使用注意事项：
1、样品中不能含有（NaN3），因为（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2、样品采集后应尽快提取。提取应根据相关文献进行。提取后应尽快进行实验。如不能立即进行试验，试样可在-20℃保存，但应避免反复冻融。
3、样品应充分离心，无溶血和颗粒。
4、实验应严格按照说明书操作进行，实验结果的判断必须以酶标仪读数为准。
5、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中，并用干燥剂保存。
6、建议所有标准品、样品和空白对照均一式两份检测，取平均值，以减少实验误差。
7、记住样品已经稀释了5倍，样品的实际浓度是通过计算结果乘以5来计算的。
8、本试剂盒的定量范围为11.25-360pg/ml。超出此范围，通过标准曲线的延伸计算。这不是一个准确的定量结果。请使用专用稀释剂稀释确定准确结果（在11.25-360pg/ml范围内），再乘以总稀释倍数即可得到样品的最终浓度。
9、如果颜色太浅，可适当延长底物孵育时间。
10、为避免交叉污染，每次添加标准品、样品和空白对照品时都应更换吸头；酶标工作液、样品稀释液、底物等常用组分加悬臂，不得接触微孔；请勿重复使用密封膜。
11、大鼠血清试剂盒应在保质期内使用，不得混用不同批次的试剂。
12、基材B对光敏感，不宜长时间暴露在光线下。
