小鼠心肌细胞分离自小鼠胚胎心脏组织,细胞呈多边形等不规则形状,2天以后大部分伸出伪足呈巴掌状部分心肌细胞会出现搏动,成熟的心肌细胞增殖缓慢或不增殖。体外培养的小鼠心肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。小鼠心肌细胞采用混合酶解法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶,细胞纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
小鼠心肌细胞使用方法:
1.取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2.待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3.细胞传代
1)吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
小鼠心肌细胞注意事项:
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月
2.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作
3.传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态
4.该细胞只可用于科研