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小鼠脑微血管内皮细胞处理方法

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2022/11/7 10:30:57

小鼠脑微血管内皮细胞处理方法及细胞说明书仅供参考,具体操作还需要根据到货时细胞密度,细胞生长状态等具体情况,酌情处理。

一.小鼠脑微血管内皮细胞贴壁细胞
  客户接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。
  肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
  显微镜观察细胞,当细胞融汇80%左右(可以传代的情况下),细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
  严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
  将细胞培养瓶内的培养基用吸管完,全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
  用PBS2-3ml/次轻轻洗细胞表面,加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
  1000rpm,5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。

二.小鼠脑微血管内皮细胞悬浮细胞
  1.接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。
  2.肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
  3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
  4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完,全吸出(严禁直接倾倒)。
  5.1000rpm,5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,37℃,5%CO2培养

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