HUVEC人脐静脉内皮细胞是一种来源于脐带组织的干细胞，它是脐静脉的重要组成细胞之一，理论上能够进行无限的传代。因此在进行血管内皮细胞实验的时候，经常用人脐带静脉内皮细胞，而不是选择静脉血管内皮细胞或者动脉血管内皮细胞。脐静脉内皮细胞的取材较为容易，来源较为充足，有提供包括产品、服务在内的厂家，因此在血管内皮的研究中经常应用脐静脉内皮细胞。
HUVEC人脐静脉内皮细胞的使用说明：
一、细胞复苏：
从液氮中取出细胞冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻至管内残留一点冰屑。用75%酒精擦拭冻存管后，将内容物吸至一15ml无菌离心管中，逐滴加入预温至37℃的RPMI-1640培液4-5ml混匀，室温1500rpm离心10分钟弃上清。再用RPMI-1640培液4-5ml洗涤一次，离心后弃上清，加HUVEC培养液4-5ml备用，每支HUVEC冻存管含细胞量为5×10个。
二、细胞接种和培养：
1、细胞接种:
(1)、包被液:用去离水配制0.5%明胶溶液，过滤除菌。
(2)、培养瓶包被:取2-4个T25培养瓶，每个培养瓶加2-3ml0.5%明胶溶液，摇匀使包被液布满培养瓶底面，置37℃2小时或放置过夜。
(3)、接种细胞:接种前吸净包被液，按2500-5000个细胞/cm接种细胞(1支5×10个细胞可接种2-4个培养瓶)，每瓶加培养液3-5ml,摇匀后置37℃5%CO2培养箱内培养24小时，此时细胞已贴壁，更换培养液后继续在37℃5%CO2培养箱内培养。
(4)、扩大培养:一般每周更换培养液2次，至细胞长至覆盖培养面的70-80%可进行传代或冻存。
三、消化细胞：
消化液:用pH7.0-7.2的PBS或D-Hank'S液，分别配制0.25%胰酶液和0.02%EDTA-Na2液，用前按1:1混合。在细胞传代或冻存前先消化细胞。具体操作如下:吸净培养液，每瓶加消化液1ml，摇匀使其布满培养瓶细胞面。37℃消化2-5分钟。显微镜下看细胞回缩成圆形后，轻轻震动使绝大部细胞脱落后，每瓶加含10%FBS的RPMI-1640液的中和液4-5ml中和胰酶的消化作用，并用吸管轻轻吹打培养面使细胞脱落后，吸至15ml无菌离心管内。4℃1500rpm离心10分钟弃上清，再用中和液洗涤细胞，离心弃上清，加适量RPMI-1640液，混匀后取10ul细胞悬液加10ul台盼蓝混匀后作细胞计数，按需要做步骤四或五。
