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解决方案 | 疫苗研发——病毒颗粒数检测(qPCR)自动化体系构建方案

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2023/3/22 13:11:26

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随着基因工程技术的发展,病毒载体在目的基因的导入和表达中得到了广泛应用。由于其效率高、适用细胞种类多、瞬时表达等特点,已经广泛应用于疫苗研发领域,对病毒颗粒数进行实时的检测是工艺中的关键环节,病毒的定量检测对于疫苗的指导研发和质量控制具有重要意义。

目前进行病毒定量的方法主要是实时荧光定量PCR方法(Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction , RT-qPCR),通过荧光定量的方法对模版拷贝数进行定量, 每个模板的Ct值与该模板起始拷贝数的对数存在线性关系,利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析,从而反映完整病毒颗粒数。

实时荧光定量PCR法目前已经发展成为病毒定量检测使用广泛的技术之一,具有特异性好、灵敏度高、污染小等优势。但实时荧光定量PCR法前期体系构建样品制备繁琐且不稳定,极占实验员时间和精力的同时也影响定量结果。

睿科Vitae 100 全自动化PCR体系构建系统能够实现体系构建流程自动化,移液准确且稳定,实验结果满足需求,解放双手的同时保证了样品检测结果的可靠性。




整体实验流程

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病毒颗粒数检测(qPCR)整体实验流程






应用场景




睿科生化为某疫苗公司腺病毒颗粒数检测提供自动化体系构建方案,具体方案如下:










实验流程






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疫苗公司腺病毒颗粒数检测自动化体系构建流程




实验结果




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标准曲线图





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样品扩增图


标准曲线图,根据主要Slope数值判断曲线的点稀释是否准确,结果显示,与客户手动操作的slope值(Slope=-3.376)一致,R²=0.999代表曲线偏离,标准曲线配置符合要求。


样品扩增图,底部ROX所在区域越集中,即体系分装越准确。结果显示,体系构建分装准确,符合要求。






产品优势






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Vitae 100全自动PCR体系构建系统


1、机械臂定位准确到0.05mm,移液精确度CV≤2%,数据稳定可靠;

2、仪器能有效解决疫苗研发过程中,样品检测和产品放行人工操作不稳定的困境;

3、加样过程自动化,体系构建全程用时25min,节省时间和人力;

4、配备紫外消毒灯和HEPA过滤装置,保证操作安全性。






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