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不要沉淀,要美观!——浅谈血清沉淀

内蒙古奥普赛生物科技有限公司

2023/8/10 11:33:29

        在细胞培养中,血清的品质在一定程度上可以影响到细胞培养的成败,如果血清中出现沉淀,不免会让人担心细胞会不会因为沉淀而出现问题。所以,关于血清沉淀,小编和大家分享以下几点内容。

一、血清沉淀物到底是什么?
常见的血清沉淀有以下几种:
        纤维蛋白:纤维蛋白是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1~2mm,可以用肉眼观察到。由于在生产过程中,血清采集、过滤和罐装处理都是在低温条件下快速完成的,血清中的纤维蛋白原处于溶解状态,但在解冻后,血清中的纤维蛋白原往往会发生凝集,形成肉眼可见的沉淀。
        磷酸钙:常见的一种沉淀物,会造成血清浑浊,并且在37℃培养的时候会增加,这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此通常会被误认为是微生物污染。
        其他:胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质也是血清中出现沉淀的常见原因。
二、血清沉淀物对细胞培养有什么影响?
        血清出现沉淀是血清的正常特性,经过我们的试验以及细胞培养经验表明,血清沉淀物不会影响细胞培养
三、血清沉淀物是不是污染?
        血清沉淀物中,磷酸钙往往会被误认为是微生物污染,特别是在37℃条件下培养后,可能会观察到更多的絮状沉淀,所以将血清放在培养箱中做无菌试验并不能直接判定血清被污染了。我们可以将血清加到细菌培养基中进行培养,观察是否有细菌生长,也可以进行革兰氏染色,在油镜下观察是否有污染。
四、血清沉淀物该怎么去除?
        血清中出现沉淀物后,可以将血清分装到无菌离心管中,以400~600g离心5min,将上清液加入到培养基中一起过滤。注意:不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物,因为这很可能会堵塞过滤膜,并且直接过滤血清,也可能会导致血清中部分营养成分的流失。
五、如何避免血清中出现沉淀物?
1采取正确的解冻方法
        (12~8℃过夜,使之部分融解
        (2再放到室温条件下使之融解
        (3在融解过程中需要规则地摇晃均匀
2采取正确的使用和保存方法
        (1非必要不灭活,热灭活会使血清中部分蛋白质变性析出,影响血清品质
        (2避免在37℃下预热血清,在室温条件下预热即可
        (3使用过程中,避免反复冻融
        (4避免紫外线照射
        (5避免在2~8℃条件下长期保存,可以将血清分装后在-15~-20℃的环境中长期保存
        (6)避免在室温条件下放置太长时间

 


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