Agilent荧光光度计是一种常用的荧光分析仪器，用于检测和定量分析荧光标记样品。它的工作原理是基于荧光发射的强度与样品中荧光物质的浓度成正比。 一、Agilent荧光光度计主要由光源、激发滤光片、发射滤光片、样品室和检测器等部分组成。其工作原理如下：
1.光源：产生紫外或可见光，照射到样品上，使荧光物质受到激发。
2.激发滤光片：选择性地允许特定波长的光线通过，使光源的其他波长光线被滤除，从而确保只有特定波长的光线能激发样品。
3.发射滤光片：选择性地允许荧光发射的特定波长通过，使其他波长的光线被滤除，从而确保只有荧光发射的光线能被检测器接收。
4.样品室：放置待测样品的区域。
5.检测器：接收荧光发射的光线，将其转换为电信号，然后通过放大和处理，显示为荧光强度。
二、荧光标记样品的制备
荧光标记样品是指通过化学反应将荧光染料连接到目标分子上，使其具有荧光发射性质。荧光标记样品的制备通常包括以下步骤：
1.选择合适的荧光染料：根据目标分子的性质和实验要求，选择具有适当激发波长和发射波长的荧光染料。
2.连接荧光染料：通过化学反应将荧光染料连接到目标分子上，形成荧光标记样品。
3.样品处理：将制备好的荧光标记样品置于样品室中，确保其能被光源照射到。
三、荧光标记样品的检测与定量分析
1.激发和发射波长的选择：根据荧光染料的性质，选择适当的激发波长和发射波长。激发波长应能使荧光染料产生更大吸收，发射波长应能使荧光染料产生更大发射。
2.荧光强度的测量：将荧光标记样品置于Agilent荧光光度计中，调整激发滤光片和发射滤光片的位置，使荧光染料受到激发并产生发射。检测器接收荧光发射的光线，将其转换为电信号，并显示为荧光强度。
3.荧光强度的定量分析：根据荧光强度与样品中荧光物质浓度之间的关系，可以对荧光标记样品进行定量分析。通常，需要绘制标准曲线，即在已知浓度的标准溶液中测量荧光强度，然后将荧光强度与浓度进行回归分析，得到标准曲线。再将待测样品的荧光强度代入标准曲线，即可得到待测样品中荧光物质的浓度。
