皖仪科技液相色谱对银黄颗粒中绿原酸的含量测定
银黄颗粒，中成药名。为清热剂，具有清热解毒，消炎之功效。主治上呼吸道感染，如急性扁桃体炎、咽炎。方中银花、连翘芳香辟秽，疏风透表，清热解毒；黄芩清泻肺热；丁香叶祛风除湿止头痛。诸药共奏疏风散热，清泻肺火之功。绿原酸是一种有机化合物，化学式为C16H18O9，是金银花的主要抗菌、抗病毒有效药理成分之一，半水合物为针状结晶（水）,110℃变为无水化合物，25℃水中溶解度为4%，热水中溶解度更大。易溶于乙醇及丙酮，极微溶于醋酸乙酯。
绿原酸具有较广泛的抗菌作用，但在体内能被蛋白质灭活。与咖啡酸相似，口服或腹腔注射时，可提高大鼠的中枢兴奋性。可增加大鼠及小鼠的小肠蠕动和大鼠子宫的张力。有利胆作用，能增进大鼠的胆汁分泌。对人有致敏作用，吸入含有本品的植物尘埃后，可发生气喘、皮炎等。
1 实验方法
1.1 仪器配置
1.2 测试条件
色谱柱：C18 5μm, 4.6×250mm；
柱温：35℃；
检测波长：327nm
流速：1.0 ml/min；
流动相：A:乙腈；B:0.4%磷酸水进样量：20μL
1.3 仪器及试剂、耗材
试剂：标准物质：绿原酸；
甲醇：色谱纯；
磷酸：分析纯；
辅助装置：分析天平；
溶剂抽滤装置；
超声波清洗机；
实验材料：
滤膜：有机相滤膜，水相滤膜0.45μm
1.4 标样制备
绿原酸：使用50%甲醇将绿原酸标准品(100 μg/mL in Methanol)稀释10倍，制成10μg/mL标准溶液。
1.5 样品配制
银黄颗粒：称取银黄颗粒0.5007g置50mL棕色容量瓶中，加50%甲醇40mL，超声处理30min，放冷，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2 结果与讨论
2.1标准品
图1 绿原酸标准品(10μg/L)色谱图
说明：由图及数据可见，峰型对称，理论塔板数为52573，满足药典要求：理论塔板数按绿原酸计不低于2000。
2.2 样品
图2 银黄颗粒特征谱图(mAU-100—1600)
图3 银黄颗粒特征谱图(mAU-20—200)
说明：由上述银黄颗粒特征谱图可见，样品分离较好，样品分离度在1.5以上。2.3 样品重复性
图4银黄颗粒色谱叠加图(n=3)
说明：由上述银黄颗粒重复性数据可见，样品重复性较好，保留时间RSD值为0.073%，峰面积RSD值为0.187%。
3 结论
本次采用皖仪科技高效液相色谱仪配置紫外-可见光检测器，依据《中国药典》2020版对银黄颗粒中的绿原酸进行含量测定，由上述数据可知，绿原酸理论塔板数为53573，符合药典要求理论塔板数按绿原酸计不低于2000；重复性较好，保留时间RSD值为0.073%，峰面积RSD值为0.187%；本次检测某品牌银黄颗粒中含绿原酸19.363μg/mL。
