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Elabscience甲酸盐比色法测试盒适用于检测动物组织样本及血清(浆)等液体样本中甲酸盐的含量。

甲酸脱氢酶(FDH)能够催化甲酸和 NAD+反应产生 NADH，NADH在PMS作用下，将电子传递给 WST-8，生产黄色的产物，其在450 nm处有特征吸收峰。样本中自身存在的NAD(P)H会产生一定的背景干扰，因此在测定过程中需要设定对照孔排除这种干扰。

试剂准备

① 检测前，试剂盒中的试剂平衡至室温。

② 试剂二工作液的配制：

取一支试剂二粉剂用0.17 mL试剂一充分溶解，临用前配制，于冰盒上取用，-20℃避光可保存7天。

③ 试剂三工作液的配制：

取一支试剂三粉剂用0.3 mL的试剂一充分溶解，临用前配制，于冰盒上取用，-20℃避光可保存7天。

④ 测定工作液的配制：

按照试剂一：试剂二工作液：试剂三工作液：试剂四 = 8：1：1：10的体积比混匀，按需要现配现用，避光保存。

实验关键点

① 试剂一取用时应倒出部分，再取用，避免试剂污染。

② 样本加入板孔中时应触底加入。

操作步骤

① 测定孔：向酶标板对应的测定孔中加入50μL的待测样本；

标准孔：向酶标板对应的标准孔中加入50μL不同浓度的标准品溶液；

② 向步骤①中各孔分别加入50μL的测定工作液；

③ 酶标仪上振板5 s，然后放入37℃恒温箱中，孵育30 min，于波长450 nm 处测定各孔OD值。

(注：随着孵育时间延长，显色会加深，在保证样本正常显色的情况下，尽量使标准曲线最高点的OD值处于1.5-2.0的范围内)

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