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微生物培养基:成分解析与常用配方实践指南

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2024/4/30 11:12:55

引言

微生物的世界丰富多彩,其研究与应用深入医药、工业、环保等诸多领域。要揭示微生物的生命奥秘并调控其生长行为,首要任务便是为其提供适宜的生存环境,即精心调配的培养基。培养基犹如微生物的“营养餐”,其成分各异,功能多样,共同构建出满足不同微生物生长需求的微生态“家园”。本文将详细解析各类菌种培养基的组成成分及其作用,并列举若干常用培养基的具体配方与应用,旨在为微生物学研究者提供全面的理论指导与实践参考。


菌种培养基成分解析

菌种培养基包含了各种微生物(包括细菌、酵母菌、霉菌和乳酸菌)培养所需的多种成分。不同成分的作用如下:

蛋白胨/牛肉膏/牛肉浸粉/酵母膏/酵母浸粉/酪蛋白胨/胰蛋白胨/大豆胨:这些都是氮源和氨基酸的来源,提供微生物生长所需的必需和非必需氨基酸,以及部分维生素和生长因子。它们对于细胞代谢、蛋白质合成和细胞增殖至关重要。

麦芽浸粉/马铃薯浸粉:作为碳源,提供微生物生长所需的能量和碳骨架,主要供微生物合成细胞物质和代谢产物。麦芽浸粉还含有丰富的麦芽糖、糊精等易被微生物利用的碳水化合物。

葡萄糖:是最直接的能源物质,可迅速被微生物代谢产生能量(ATP),支持细胞生长和代谢活动。

氯化钠/硫酸镁/MgSO4·7H2O/KH2PO4/磷酸氢二钾/磷酸二氢钾/氯化钙:这些无机盐和矿物质元素作为微生物生长必需的微量元素,参与酶活性调节、维持渗透压平衡、稳定细胞膜结构以及参与某些生化反应(如磷酸化反应)。

硫酸锰/硫胺素/半胱氨酸盐酸盐:特定的维生素和微量元素,满足特定微生物的特殊营养需求,如硫胺素(维生素B1)对于酵母和某些细菌的生长有利,半胱氨酸盐酸盐作为还原剂和硫源,对某些微生物的生长有利。

琼脂:作为凝固剂,用于制备固体培养基。它在冷却后形成稳定的凝胶结构,便于微生物的接种、观察和计数。

吐温80:作为非离子表面活性剂,能降低培养基的表面张力,提高营养成分的溶解度,有助于乳酸菌的生长和增殖。

乙酸钠/柠檬酸二铵:有机酸盐,作为缓冲体系的一部分,维持培养基的pH稳定,为微生物提供适宜的生长环境。

氯霉素:作为选择性抑菌剂,抑制细菌生长,有利于霉菌和酵母菌的增菌培养。

特殊蛋白胨/可溶性淀粉:特殊蛋白胨提供丰富营养,可溶性淀粉作为碳源,同时该培养基含有的血液成分(如血红蛋白)可作为某些需血细菌的生长因子。

无菌脱纤维绵羊血:用于观察细菌的溶血现象,有助于细菌分类鉴定。

维生素K1溶液/氯化血红素溶液:提供特定微生物生长所需的维生素和生长因子。

总结起来,这些成分在培养基中各自发挥着提供碳源、氮源、能源、生长因子、微量元素、缓冲体系、凝固剂、抑菌剂、表面活性剂等作用,共同构建出能满足不同微生物生长需求的营养环境。根据目标微生物的特性,选择或设计合适的培养基配方,有助于优化微生物的生长状况和实验结果。


常用菌种培养基

1、营养琼脂培养基

成分含量
蛋白胨10.0 g
牛肉膏3.0 g
氯化钠5.0 g
琼脂15.0 g
pH7.3 ± 0.1 (25℃)

使用方法:称取上述成份33.0g于1L蒸馏水或去离子水中(可按比例增加或减少配制量),加热煮沸至溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟或115℃灭菌30分钟,灭菌结束后请摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固,备用

主要用途:细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用(GB标准)

保存说明:室温、避光、干燥

相关资源:HZB875002


2、麦芽汁琼脂培养基

成分含量
麦芽浸粉130.0 g
氯霉素0.1 g
琼脂15.0 g
pH6.0±0.2(25℃)

使用方法:称取上述成分145.1g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸持续1分钟以上使溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟,倾注平板,备用

主要用途:用于霉菌和酵母菌增菌培养

保存说明:室温、避光、干燥

相关资源:HZB875063


3、MRS琼脂培养基

成分含量
蛋白胨10.0 g
牛肉浸粉8.0 g
酵母粉4.0 g
葡萄糖20.0 g
硫酸镁0.2 g
乙酸钠5.0 g
柠檬酸二铵2.0 g
磷酸氢二钾2.0 g
硫酸锰0.04 g
吐温801.0 g
琼脂14.0 g
pH5.7±0.2(25℃)

使用方法:称取上述成分66.24g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸持续1分钟以上使溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟,摇匀,倾注平板,冷却,备用

主要用途:乳酸菌培养及计数

保存说明:2-8℃保存

相关资源:HZB875009


4、马铃薯葡萄糖琼脂培养基

成分含量
马铃薯浸粉6.0 g
葡萄糖20.0 g
琼脂20.0 g
pH5.6±0.2(25℃)

使用方法:称取上述成分46.0g于1L蒸馏水或去离子水中,微温溶解,分装,115℃灭菌30分钟,灭菌结束后请摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固,冷至50℃左右,倾注平皿,备用

主要用途:霉菌,酵母菌培养及计数

保存说明:室温、避光、干燥

相关资源:HZB875012


5、综合马铃薯琼脂培养基

成分含量
马铃薯浸粉10.0 g
葡萄糖20.0 g
KH2PO43.0 g
MgSO4·7H2O1.5 g
硫胺素0.008 g
琼脂15.0 g
pH6.0±0.2(25℃)

使用方法:称取上述成分49.6g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟或115℃高压灭菌30分钟,灭菌结束后请摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固,备用。因含马铃薯粉而呈白色不透明状态

主要用途:真菌的分离培养

保存说明:室温、避光、干燥

相关资源:HZB875004


6、哥伦比亚血琼脂培养基

成分含量
特殊蛋白胨23.0 g
可溶性淀粉1.0 g
氯化钠5.0 g
琼脂10.0 g
pH7.3±0.2(25℃)

使用方法:称取上述成分39.0g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸持续沸腾1分以上使溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却至45~50℃,无菌操作每100ml培养基加入5ml预热的无菌脱纤维绵羊血,轻轻摇匀,倾注平板

主要用途:用于营养需求比较高细菌培养,分离,溶血实验

保存说明:室温、避光、干燥

相关资源:HZB875001


7、YM琼脂培养基

成分含量
酵母浸粉3.0 g
麦芽提取物3.0 g
葡萄糖10.0 g
酪蛋白胨5.0 g
琼脂20.0 g
pH6.2±0.2(25℃)

使用方法:称取上述成分41.0g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟,灭菌结束后请摇匀,以防止琼脂沉积于器皿底部而凝固,备用

主要用途:霉菌、酵母菌的分离培养

保存说明:室温、避光、干燥

相关资源:HZB875006


8、LB琼脂培养基

成分含量
酵母膏5.0 g
蛋白胨10.0 g
氯化钠10.0 g
琼脂15.0 g
pH7.0±0.2(25℃)

使用方法:称取上述成分40.0g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,烘干后转移至超净工作台制作成平板

主要用途:细菌增菌培养

保存说明:室温、避光、干燥

相关资源:HZB875007


9、胰蛋白胨大豆液体培养基

成分含量
胰蛋白胨17.0 g
大豆胨3.0 g
氯化钠5.0 g
磷酸氢二钾2.5 g
葡萄糖2.5 g
pH7.3±0.2(25℃)

使用方法:称取上述成分40.0g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,烘干后转移至超净工作台制作成平板

主要用途:一种通用的营养培养基,用于各种微生物的培养,也可用于阪崎肠杆菌的纯化培养和产黄色素试验

保存说明:2-8℃保存

相关资源:HZB875005


10、PYG液体培养基

成分含量
蛋白胨20.0 g
葡萄糖5.0 g
酵母浸粉10.0 g
氯化钠0.08 g
半胱氨酸盐酸盐0.5 g
氯化钙0.008 g
硫酸镁0.008 g
磷酸氢二钾0.04 g
磷酸二氢钾0.04 g
碳酸氢钠0.4 g
pH6.0±0.1(25℃)

使用方法:称取上述成分 18.04g,加热溶解于500ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,冷至 50℃左右时,加入过滤除菌的维生素 K1溶液 0.5ml 和氯化血红素溶液(5mg/ml ) 2.5ml,混匀,备用

主要用途:用于细菌的培养

保存说明:2-8℃保存

相关资源:HZB875047


总结

培养基是微生物研究与应用的核心工具,其精确配方关乎微生物的生长性能与实验结果。文中详述了培养基中的氮源、碳源、能源、生长因子、微量元素、缓冲体系、凝固剂、抑菌剂、表面活性剂等多元成分,阐述了各成分对微生物生长代谢的重要影响。随后列举的十种常用培养基,如营养琼脂、麦芽汁琼脂、MRS琼脂等,不仅展示了其特定成分与用量,还明确了适用对象、制备方法与储存条件,为实际操作提供了清晰指南。综上,理解并合理选用培养基,既是揭示微生物生命活动的基础,也是推动微生物技术发展的关键。


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更新日期:2024-04-30


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