上皮细胞是抵御病原体入侵的主要防线。然而，细菌病原体具有破坏这一屏障并促进细菌迁移的能力。然而，结核分枝杆菌(M.tb)在这一过程中所采用的具体分子机制尚不清楚。
在吸入气溶胶颗粒后，细菌往往在肺部形成持续感染，导致特征性肺结核综合征的发展。此外，结核分枝杆菌可以突破肺泡屏障，从而引发肺外结核。结核分枝杆菌的发病机制严重依赖于全身传播，尽管其确切的潜在机制尚未阐明。
肺泡上皮屏障由紧密连接和粘附连接组成，在抵御病原体入侵方面起着重要的作用。在近日发表的一项研究中，科研人员提出了，关于结核分枝杆菌胞外丝氨酸蛋白酶Rv2569c的重大发现，该酶通过e -钙粘蛋白的裂解促进细菌的转运。文章标题为：“Serine protease Rv2569c facilitates transmission of Mycobacterium tuberculosis via disrupting the epithelial barrier by cleaving E-cadherin”
实验结论：
科研人员通过评估Rv2569c切割e -钙粘蛋白的能力，来研究Rv2569c在结核分枝杆菌易位中的作用。e -钙粘蛋白是细胞-细胞粘附连接的重要组成部分，在细菌入侵期间被破坏。利用在大肠杆菌中表达并通过亲和层析纯化的重组Rv2569c，实验证明了Rv2569c具有细胞壁相关丝氨酸蛋白酶活性。
此外，Rv2569c能够降解一系列蛋白质底物，包括酪蛋白、纤维蛋白原、纤维连接蛋白和e -钙粘蛋白。
科研人员还确定了Rv2569c蛋白酶活性的适宜条件是温度为37℃，pH为9.0,MgCl2存在。为了研究Rv2569c在结核分枝杆菌中的功能，科研人员制备了Rv2569c的缺失突变体及其补充菌株，并将其用于感染A549细胞和小鼠。
A549细胞感染实验结果显示，Rv2569c具有裂解E-cadherin的能力，促进M.tb通过极化的A549上皮细胞层迁移。此外，体内感染实验表明，Rv2569c可以破坏E-cadherin，增强M.tb的定植，并在C57BL/6小鼠的肺部引起病理损伤。
总之，这些结果强烈表明结核分枝杆菌利用丝氨酸蛋白酶Rv2569c破坏上皮防御，并通过跨越上皮屏障促进其全身传播。
好物推荐：
本实验中的细胞感染实验，用到了A549细胞系。A549细胞系是肺癌人类肺泡基底上皮细胞，该实验选择Ausbian进口胎牛血清，用于配制培养液。
Ausbian胎牛血清优势：
1.精选内毒素更低批次（≤3EU/ml），澳洲血源。
2.新批次在试用前，提供试用服务，养细胞更放心。
3.每个批次产量800-2000升，试用满意的实验室批号优先锁定，保证大多数项目两年不需换批次，细胞试验数据稳定。
4.每年按厂家生产顺序，会有多批次平行供应，每个实验室专属批号管理，保证供货稳定。
5.为Ausbian血清用户提供申报支持，具有完整的检测报告，为各类项目的申报提供支持（同时为血清VIP用户在支原体检测、方法学验证等方面，提供更多免费延伸性技术帮助）。
6.针对特殊科研项目，可提供3-5个平行批次，让试验人有更多选择空间。
7.为Ausbian进口血清提供代储存服务，为储存空间不足的实验室提供可靠的血清仓储保护，按要求随时发货。
8.Ausbian血清从出厂，到实验室，全程低温冷链保护，确保血清无反复冻融。
