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培养基培养方法

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2014/11/27 19:00:23

       培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制养料,一般含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等,有的还含有抗菌素、色素、激素和血清。培养基由于配制的原料不同、使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同;液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。

培养基培养方法:

1.配料

配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水,自然水〕→按照配方称取各种药品〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺,取药后立即盖上瓶盖》。

2.溶解

淀粉溶解:少量冷水调成糊状

加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃ ,且需要边

加热边搅拌以防止烧焦。

3.调PH

用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。

4.过滤

滤纸或棉花进行过滤。

5.分装

一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

(1)三角瓶

若作静置培养,则100 ml培养基/250 ml的三角瓶,zui多不能超过150 ml培养基/250 ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15~20 ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。

(2)试管分装

液体培养基一般装4~5 ml,约试管的1/4高度;

固体斜面培养基一般装3~4 ml,约试管的1/5高度。

6.包扎

分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

7.灭菌

按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养

基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

8.摆斜面

灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。

9.贮存

培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。  

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