上海科敏生物科技有限公司
2016/6/2 15:01:10使用基因工程的方法来表达蛋白质，必须经过纯化才能实现zui终目的。不同性质的蛋白质纯化条件有所不同，亦很难摸索。所以将目的蛋白和一个亲和纯化的标签蛋白进行融合表达-通过亲和纯化Tag蛋白来纯化目的蛋白，就成为常用的间接手段。 而His-Tag这个只有6个组氨酸大小的标签蛋白在pH值8.0时不带电，几乎没有免疫原性。经过对很多种蛋白的融合验证试验，无论对蛋白的分泌、折叠结构、甚至功能都没有影响，即可放在N端也可放在C端，而更重要的是使用6HIS抗体装配的亲和层析纯化柱，通过免疫亲和层析纯化的方法-将带有6个组氨酸标签的目标蛋白纯化出来，不但目标蛋白纯度高，而且简单、易行，成本低。所以对融合蛋白纯化很方便、实用。因此，已得到国内外人员的广泛应用。 His-Tag的特点： 1） 6xHis与不同的Sepharose纯化填料结合(捆绑)，可不受构象的影响，在天然或变形的条件下可进行进一步纯化。 2） 可在温和的洗脱液环境中，其结合、洗涤及洗脱步骤不会对蛋白结构产生影响。 3） 6xHis标签比普通（Tag）要小得多，经纯化后的蛋白可直接进行下游操作。可用于任何表达系统（包括：细菌，杆状病毒和哺乳动物） 4） 6xHis标签在生li溶液pH下不带电荷，其标签不会干涉重组蛋白的结构和功能， 6xHis不会影响蛋白分泌 5） 6xHis标签免疫原性差，重组蛋白可以不必除去标签而直接作为抗原进行免疫
