人体螨虫特异性IgE ELISA试剂盒

1试剂的准备

　　按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂.ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的.自配的缓冲液应用pH计测量较正.从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用.试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存.

2试剂盒组成

    48孔配置96孔配置保存

　　说明书1份1份

　　封板膜2片（48）2片（96）

　　密封袋1个1个

　　酶标包被板1×481×962-8℃保存

　　标准品：13.5U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存

　　标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存

　　酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

　　样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

　　显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

　　显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

　　终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

　　20倍浓缩洗涤液20ml×1瓶30ml×1瓶2-8℃保存

3样本处理及要求：

　　1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

　　2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

　　3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

　　4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

　　6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

　　7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

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