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【中文名称】：Aromatase mRNA原位杂交试剂盒

【英文名称】：Aromatase  mRNA FISH Kit

【规 格】：100T/盒

【主要用途】：科研检测（仅用于科研实验），不得用于临床  

【保 存】：  4°C保存一年   

Aromatase mRNA原位杂交试剂盒原理：

FISH—Cellscience设计的原位杂交，用以显示组织和细胞中mRNA的分布。探针的3，端标记地高辛，5’端标记荧光素。生物素标记的抗地高辛抗体可以与链霉亲和素标记的过氧化物酶或碱性磷酸酶结合，作用于相应的显色底物DAB或NBT/BCIP，显色为棕黄色或蓝紫色，探针5，端标记的荧光素，可以在荧光显微镜492-549nm时发出黄绿色荧光来显示被检测mRNA之信号。此方法的灵敏度可基本上替代放射同位素标记的探针且具有低背景和操作简便的优点。也可以用于Northern和Southern的检测以及原位PCR 。

原位杂交的注意事项：
原位杂交成套试剂盒，由于采用高效标记的探针和敏感性加强型原位杂交检测试剂盒；使得原位杂交实验的成功率大大提高，操作也更简便。但仍有一些问题是引起注意的；
1、有条件应尽可能用新鲜标本，并及时进行固定。固定液为4%多聚甲醛（0.1MPBS，PH7.0-7.6）含0.1%DEPC。因为mRNA类基因容易降解。
2、标本的消化对原位杂交比较重要，适当的消化将使靶基因充分暴露，增加探针的接触性。但过度的消化将使标本明显减薄乃至消失。不同的标本对消化的敏感性不同。常用的消化酶有蛋白酶K和胃蛋白酶。大量标本实验前，应仔细摸索*的消化条件。蛋白酶K的消化条件为10ug/mL（0.1M TBS,PH7.2-7.6），37℃消化1-5分钟。
3、杂交后的洗涤对信号/背景/强度有密切关系，洗涤时间越短，信号越强，背景也越高；洗涤时间超长，信号越低。适当的洗涤时间会获得理想的信号强度和可以忽略的背景染色。

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