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详细信息

人柯萨奇病毒IgG Cox V-IgG ELISA试剂盒

人柯萨奇病毒IgG Cox V-IgG ELISA试剂盒标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。

培养基 :"*培养基有售，用我们拜力生物的*培养基，细胞培养更省心！"

供应商 :拜力生物

货期 :7-10天

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。

2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。

3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。

5. 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。

6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。

7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。

建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

洗板方法

1. 手工洗板方法：吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。

2. 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

计算

以标准物的浓度为纵坐标(对数坐标)，OD值为横坐标(对数坐标)，在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如curve expert 1.3，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

◇ 注意事项：

收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分标本需添加抑肽酶。

◇ 液体类标本

标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。

◇ 血清：

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 血浆：

应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10％(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 尿液、胸腹水、脑脊液：

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 组织标本：

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

【生物分子】抗生素/抗真菌素维生素氨基酸核苷酸脂糖类白三烯前列腺素药物结合物抗氧化剂药理活性化合物类固醇激素结合物半抗原反应半抗原载体结合物放射性核素血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物亲和素/链霉亲和素
【蛋白质/抗原/多肽】免疫球蛋白封闭肽人蛋白和抗原小鼠蛋白和抗原细菌蛋白和抗原病毒蛋白和抗原植物蛋白和抗原其它蛋白和抗原细胞质蛋白总蛋白膜蛋白核蛋白细胞裂解和提取物线粒体蛋白细胞裂解组织提取重组细胞因子
【常用生化试剂】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水分子生物学缓冲液蛋白生化缓冲液去垢剂染色试剂溶剂酸碱化学试剂其它生化试剂
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR试剂 PCR对照特异性PCR试剂盒 PCR克隆试剂盒 RNA 载体及构建 PCR克隆载体 M13克隆载体细菌克隆载体文库及构建 cDNA文库基因组文库噬菌体展示文库
【酶】限制性内切酶蛋白酶核酸酶激酶聚合酶连接酶
【cDNA及合成纯化】cDNA全长基因 RNA cDNA合成 cDNA相关试剂
【核酸/蛋白合成】Oligo纯化核酸合成柱核酸合成试剂
【克隆与表达】克隆基因克隆试剂盒克隆筛选
【表达分析】 Northern印迹分析分支DNA和mRNA定量
【蛋白分析】 PAGE凝胶制备蛋白电泳试剂预制蛋白凝胶
【核酸纯化】 DNA凝胶纯化 DNA提取纯化 PCR产物纯化
【RNAi技术】 siRNA 反义寡核苷酸 RNAi定量 RNAi文库
【蛋白检测】 Western印迹报告基因检测蛋白检测试剂盒
【实验动物】转基因动物小鼠大鼠模式动物
【临床检测试剂】生化检测遗传学检测血液检测
【相关检验试剂】食品安全检测药品安全检测
【蛋白纯化】蛋白提取蛋白透析蛋白定量蛋白稳定
【细胞培养】血清血清替代物细胞培养基细胞细胞株感受态细胞新鲜细胞分离
【干细胞】干细胞/祖细胞原代细胞干细胞培养基
【蛋白修饰】蛋白标记载体蛋白结合其它
【细胞生物学检测】细胞凋亡细胞分离细胞增殖
【药物筛选】荧光素细胞活力/增殖/毒性检测
【免疫检测】放射性免疫检测化学发光免疫检测

现在一般完整的试剂盒应该有一下几个组成：

（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；

（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

（3）酶的底物；

（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定中）；

（5）结合物及标本的稀释液；

（6）洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；

（7）酶反应终止液，常用的HRP反应终止液为硫酸，其浓度按加量及比色液的体积而异，在板式ELISA中一般采用3mol/L。

血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。血浆：应根a据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10％(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。尿液、胸腹水、脑脊液：用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液。

1.基因工程的酶和试剂; PCR酶，DNA连接酶，RNA酶ħ等

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12.抗体; 表观遗传学和染色质

13; 抗体; 蛋白酶体，泛素和SUMO

14.抗体; 分化，胚胎学和干细胞生物学

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发酵/代谢物经验带来了另一个有益的产品线。这是向体外诊断（IVD）医疗设备行业提供离子载体组分。自然发酵离子载体，如缬氨霉素，离子霉素，A23187，尼日利亚菌素，无活菌素，恩镰孢素，丙甲菌素，...用作离子选择电极（ISE）。

合成地，产生的离子载体如锂离子载体VIII，CA-1001，莫能菌素甲酯 ......可用作ISE，以及基于离子载体的光学传感器（IBOS）。这些化合物在快速增长的可穿戴生物传感器市场中具有很大的前景，并已被证明是不断增长的市场。

在酶反应中，将固定在孔上的夹心复合物与底物溶液一起温育，然后通过分光光度微量滴定板读数器测量。与孔结合的复合物的酶活性与样品中FGF-23的量成正比。通过绘制吸光度对比FGF-23标准品的每种浓度来产生标准曲线。从该曲线确定样品中FGF-23的浓度。