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人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C Cys-C
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人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C Cys-C ELISA试剂盒
血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。血浆:应根a据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。尿液、胸腹水、脑脊液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或- 70度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
【生物分子】 抗生素/抗真菌素 维生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖类 白三烯 前列腺素 药物结合物 抗氧化剂 药理活性化合物 类固醇激素结合物 半抗原反应 半抗原载体结合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 亲和素/链霉亲和素
【蛋白质/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封闭肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 细菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 细胞质蛋白 总蛋白 膜蛋白 核蛋白 细胞裂解和提取物 线粒体蛋白 细胞裂解 组织提取 重组细胞因子
【常用生化试剂】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物学缓冲液 蛋白生化缓冲液 去垢剂 染色试剂 溶剂 酸碱 化学试剂 其它生化试剂
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR试剂 PCR对照 特异性PCR试剂盒 PCR克隆试剂盒 RNA 载体及构建 PCR克隆载体 M13克隆载体 细菌克隆载体 文库及构建 cDNA文库 基因组文库 噬菌体展示文库
【酶】限制性内切酶 蛋白酶 核酸酶 激酶 聚合酶 连接酶
【cDNA及合成纯化】cDNA全长基因 RNA cDNA合成 cDNA相关试剂
【核酸/蛋白合成】Oligo纯化 核酸合成柱 核酸合成试剂
【克隆与表达】克隆基因 克隆试剂盒 克隆筛选
【表达分析】 Northern印迹分析 分支DNA和mRNA定量
【蛋白分析】 PAGE凝胶制备 蛋白电泳试剂 预制蛋白凝胶
【核酸纯化】 DNA凝胶纯化 DNA提取纯化 PCR产物纯化
【RNAi技术】 siRNA 反义寡核苷酸 RNAi定量 RNAi文库
【蛋白检测】 Western印迹 报告基因检测 蛋白检测试剂盒
【实验动物】 转基因动物 小鼠 大鼠 模式动物
【临床检测试剂】 生化检测 遗传学检测 血液检测
【相关检验试剂】 食品安全检测 药品安全检测
【蛋白纯化】 蛋白提取 蛋白透析 蛋白定量 蛋白稳定
【细胞培养】 血清 血清替代物 细胞培养基 细胞 细胞株 感受态细胞 新鲜细胞分离
【干细胞】 干细胞/祖细胞 原代细胞 干细胞培养基
【蛋白修饰】 蛋白标记 载体蛋白结合 其它
【细胞生物学检测】 细胞凋亡 细胞分离 细胞增殖
【药物筛选】 荧光素细胞活力/增殖/毒性检测
【免疫检测】 放射性免疫检测 化学发光免疫检测
现在一般完整的试剂盒应该有一下几个组成:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
(7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的体积而异,在板式ELISA中一般采用3mol/L。
【原理】
是利用固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合。