北京Gibco10*1L12400-024*DMEM/F12 进口*

试剂的准备
 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
  手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
1.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.  待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；
4.  随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体50μL，，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.  所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.  所有孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

北京Gibco10*1L12400-024*DMEM/F12 进口*

试剂盒组成

名称    96孔配置    48孔配置    备注
微孔酶标板    12孔×8条    12孔×4条    无
标准品（80 U/ml）    0.5mL     0.5mL     按说明书进行稀释
标准品稀释液    6mL    3mL    按说明书进行稀释
样本稀释液    6mL    3mL    按说明书进行稀释
检测抗体-HRP    6mL    3mL    无
20×洗涤缓冲液    20mL    20mL    按说明书进行稀释
底物A    6mL    3mL    无
底物B    6mL    3mL    无
终止液    6mL    3mL    无
封板膜    2张    2张    无
说明书    1份    1份    无
自封袋    1个    1个    无
注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：80、40、20、10、5、0U/ml.

430168    (正方斜口)细胞培养瓶    Corning    25CM2
3055    (黑盖三角斜口)细胞培养瓶    Corning    25CM2
430720    细胞培养瓶    Corning    75CM2
430639    透气盖细胞培养瓶    Corning    25CM2
430641    透气盖细胞培养瓶    Corning    75CM2
430823    150cm2培养瓶（5个/包）    Corning    150cm2
431079    175cm2培养瓶（5个/包）    Corning    175cm2
431081    225cm2培养瓶（5个/包）密封盖    Corning    225cm2
3421    Transwell 聚碳酸酯膜嵌套5.0um    Corning    6孔
3422    Transwell 聚碳酸酯膜嵌套8.0um    Corning    6孔
3916    黑色细胞培养板 20块/包 （平底）    Costar    96孔
3925    黑色酶标板(不可拆)25块/包    Costar    96孔
3590    酶标板(可拆)25块/包    Costar    96孔
9018    酶标板(不可拆 独立包装)    Costar    96孔