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人卵巢癌细胞系Anglne

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详细信息

人卵巢癌细胞系Anglne

产品名称:Anglne细胞

中文名称:人卵巢癌细胞系

生长状态:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

货号:suer0043

运输方式:干冰运输或复苏活细胞

细胞数量:>5×100000cells/瓶

库存状态:现货

特惠价格:致电

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复苏原则:快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。

冻存原则:阶梯温度冻存:分别经过4度,-20度,-80度和液氮的依次过程进行冻存,可以zui大限度的保存细胞活力。

一. 实验前准备:

1.将水浴锅预热至37℃

2.用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。

3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。

二.取出冻存管:

1.根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。

2.从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。

三.迅速解冻:

1.迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化。

2.约1-2min后冻存管内液体*溶解,取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁,再拿入超净台内。

四.平衡离心:用架盘天平平衡后,放入离心机中3000r/min 离心3min 

五.制备细胞悬液:

1.吸弃上清液。

2.向离心管内加入10ml培养液,吹打制成细胞悬液。

六.细胞计数:细胞浓度以5×105/ml为宜。

七.培养细胞:

将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃5%CO2的培养箱内2-4小时(或者24-48小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。

初学者易犯错误:

1水浴锅未预热或者未预热到37℃。

2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。

3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。

4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。

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