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原位杂交（组织芯片）
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关于我们
上海信帆生物科技有限公司（Shanghai Xinfan Biotechnology Co.,Ltd）成立于上海，是一家集“产品研发、销售、技术服务”为一体的生物公司。经过多年的努力发展已成为专业供应各类生物科研用品的公司，长期专注于生物领域，旗下代理产品种类众多。信帆生物秉承以产品质量为根本，以市场需求为导向，以为客户创造价值为己任的精神，坚守产品质量的可靠、稳定，并严格秉承“专业、诚实、守信、创新”全过程、多方位的质量监控检测，从包装到品质，从产品到服务，每个环节，我们都严控质量关，力求为客户提供更好的、更专业性的技术服务和科研产品。我们供应的产品包括elisa试剂盒，生化试剂盒，动物血制品，抗体，质控品，干扰物质，抗原，生化试剂，实验耗材等10万余种类，公司长期致力于为客户提供RT-PCR检测、病理染色、免疫组化检测、Western blotting检测、生化检测、ELISA检测、放免检测等一系列实验代测服务。产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域。
主营业务
主营产品: 质控品，干扰物质，抗体抗原，elisa试剂盒，动物血制品，生化试剂盒等。实验代做服务：HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR）、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测、RACE、全基因合成、线粒体测序、基因克隆、定点突变、染色体步移、基因组全序列获取、环境微生物多样性、微生物基因组测序、微生物菌种鉴定、甲基化分析服务等。经销品牌：Abcam、Sigma、CST、Amresco、BD、Enzo、Bio-Rad、merck、Santa Cruz、Jackson、R&D、Merck Millipore、gibco、hyclone、Bio-World、NEB、Tocris、Corning、Axygen等等。
核心价值
公司本着以专业的产品、合理的价格、完善的服务，为客户提供更好的，更专业的技术服务和科研产品。公司以“质量为重，专业服务”的原则，致力于为用户提供高性价比的试剂盒和检测服务，提供全程咨询和技术支持，包括确定测定指标、选择合适的试剂盒规格、试剂盒保存、预测定和测定结果分析等。高质量的产品，让用户省心；专业的检测服务，让用户省力；优惠的价格，让用户省钱。信帆生物为广大用户提供各类检测服务，帮助老师轻松获得了真实可靠的检测数据，显著提高了用户的科研效率，为其发表高水平的研究论文提供了坚实的平台；为研究生按时毕业，导师顺利结题、申请新课题和晋升职称提供了实实在在的帮助，公司客户遍布国内各大学、医院、研究所、卫生防疫、生物公司等单位。
详细信息
原位杂交（组织芯片）
服务介绍：
原位杂交原理：原位杂交是指将特定标记的已知序列核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。原位杂交亦可以应用于组织芯片的检测。结果更丰富，更具有对比性。
名称 | 规格 |
原位杂交（组织芯片） | 张 |
实验流程：
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-DEPC水洗。
2、消化：根据组织固定时间长短，切片于修复液中煮沸10-15分钟，自然冷却。后基因笔画圈，根据不同组织不同指标特性，滴加蛋白酶K(20ug/ml) 37°消化20-30 min。纯水冲洗后PBS洗3次×5min。
3、阻断内源性过氧化物酶：滴加3%甲醇-H2O2，室温避光孵育15min，将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
4、预杂交：滴加预杂交液，37°C孵育1h。
5、杂交：倾去预杂交液，滴加含探针杂交液, 恒温箱 37度杂交过夜。
6、杂交后洗涤：洗去杂交液，2×SSC，37°C 洗10min，1×SSC，37°C洗2×5min，0.5×SSC室温洗10min。若非特异杂交体较多，可以增加甲酰胺洗涤。
7、滴加封闭液：滴加封闭血清 BSA。室温30min。
8、滴加鼠抗地-高辛标记过氧化物酶(anti-DIG-HRP)：倾去封闭液，滴加anti-DIG-HRP。37°C孵育40min，后PBS洗4次×5min。
9、DAB显色：切片稍甩干后，在圈内滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下控制显色时间，阳性为棕黄色，纯水冲洗切片终止显色。
10、复染细胞核：Harris苏木素复染3min左右，自来水洗，1%盐酸酒精分化数秒，自来水洗，氨水返蓝，流水冲洗。
11、脱水封片：将切片依次放入75%酒精6min-85%酒精6min—100%酒精I 6min—100%酒精II 6min-正丁醇6min—二甲苯透明，将切片从二甲苯中拿出稍晾干后，中性树胶封片。
15、显微镜检，图像采集分析。
结果判读：
阳性为棕黄色，细胞核为蓝色。
送样要求：
1、切片前处理要求：新鲜组织干冰运输后做冰冻切片；或取2mm左右厚度的新鲜组织，5min内投入原位杂交固定液内固定，4℃低温保存运输，切勿冷冻结冰，尽快包埋切片后进行原位杂交实验，固定时间过长影响核酸检出率；
2、冰冻切片：冰冻切片-20℃运输；
3、石蜡切片：石蜡切片常温运输；
4、细胞爬片：细胞爬片加原位杂交固定液固定15min后，换无酶PBS，密封，4℃运输。
单据填写：
1、探针合成：需提供待测目的基因序列或基因登录号、所需标记类型；
2、自带探针需告知完整探针信息；
3、写明检测要求。
