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人细胞间粘附分子1(ICAM-1)ELISA试剂盒
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产品名称:人细胞间粘附分子1(ICAM-1)ELISA试剂盒
英文名称:Human ICAM-1 ELISA Kit
产品货号:XFH12875
规格:48T/96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
用途:本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人细胞间粘附分子1(ICAM-1)的含量。
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
背景介绍:
ICAM-1(细胞间粘附分子1)也被称为CD54(分化簇54),是一种蛋白质,由ICAM1基因编码,通常在内皮细胞和免疫系统细胞中表达。它与CD11a/CD18或CD11b/CD18型整合素结合,也被鼻病毒利用作为进入呼吸道上皮的受体。ICAM-1是免疫球蛋白超家族的一个成员,该超家族的蛋白质包括抗体和T细胞受体。它是一种跨膜蛋白,拥有一个氨基端胞外结构域、一个跨膜结构域和一个羧基端胞质结构域。
检测原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人细胞间粘附分子1(ICAM-1)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻-底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人细胞间粘附分子1(ICAM-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应
重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15%
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织-剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人细胞间粘附分子1(ICAM-1)ELISA试剂盒