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AP12L034/AP12L036 PikoOrange蛋白定量试剂盒
- 型号
- AP12L034/AP12L036
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公司前身为上海李记生物科技有限公司，成立于2015年。和元李记在2023年由和元生物和李记生物合资成立，是集研发、生产、销售为一体的国产生物试剂公司，专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供技术优秀 、方便易用、经济高效的产品，产品范围包括：细胞生物学、分子生物学、免疫学和生物化学相关的实验试剂及试剂盒。
目前在全国40余座城市均有授权代理；直接服务终端超千家，涵盖CRO、药企、高校、医院和科研院所；李记产品已帮助客户发表数百篇SCI，多篇CNS。
优势产品：蛋白Marker、EZ Trans细胞转染试剂、CCK-8、支原体快速检测试剂盒、核酸染料（GelRed/GelGreen）、EZ Protein any KD PAGE蛋白电泳试剂盒、荧光染料（Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5）、胎牛血清、细胞凋亡检测试剂盒等。
详细信息
产品描述
PikoOrange Protein Quantitation Kit是一个高度敏感的基于荧光技术定量纯化蛋白质的试剂盒，其检测蛋白浓度范围为0.1~10 μg/ml。比起传统定量方法如BCA、Bradford或Lowry蛋白定量分析，PikoOrange蛋白定量试剂盒敏感性更佳，此外，与NanoOrange蛋白质定量测定技术相比具有更好的的线性和重现性。PikoOrange蛋白定量试剂盒可显示不同蛋白质之间的小变异性，且荧光信号稳定长达16 h；其受测样本不论为纯化蛋白或抗体皆适用。需特别注意的是，PikoOrange对盐类、缓冲液、去垢剂或是其他化学物质都有不同程度的耐受性（表1）。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| PikoOrange 蛋白定量试剂盒 | AP12L034 | 100 assays | 180 |
| PikoOrange 蛋白定量试剂盒 | AP12L036 | 1000 assays | 1500 |
产品组分
| 组分 | AP12L034 | AP12L036 |
| A: PikoOrange buffer, 10X (contains 2mM sodium azide) | 2.5 mL | 25mL |
| B: PikoOrange dye, 500X in DMSO | 125 μL | 1.25 mL |
| C: Bovine serum albumin (BSA) standard, 2mg/mL (contains 2 mM sodium azide) | 40 μL | 0.4 mL |
运输与保存
常温运输。组分A常温保存；组分B常温避光保存；组分C 4℃ 保存。有效期36个月。
【注】：如果缓冲液出现沉淀，可加热到37℃并漩涡溶解。
使用方法
制备1x PikoOrange缓冲液: 1:10 稀释10x缓冲液在dH2O。例如，添加1 mL10x 缓冲液至9 mL dH2O。 PikoOrange缓冲液可以储存在室温下。
使用前准备PikoOrange工作液：将200xPikoOrange染料按1:200用1x PikoOrange缓冲液稀释。例如，添加25 μL 500x PikoOrange染料至5 mL 1x PikoOrange缓冲液。
注意：您将需要大约3 mL工作液制作标准曲线（见表2)以及每孔检测样品250 μL工作液。准备未知样本：10 μL 样本添加 250 μL PikoOrange工作液。
注意：您可能需要稀释未知样本以得到不同浓度的样本。样品稀释可能会减少干扰物质的影响。准备一个蛋白质标准曲线所需的BSA浓度，如表2所示。
样本和标准蛋白加热至90~ 95℃ 10分钟，此过程需避光操作。
取出样本室温避光放置20 min冷却。短时间离心收集全部样本。
每个标准样品或未知样品取200 μL转移到96孔酶标板，荧光酶标仪读数。激发/发射波长为480/598 nm。
【注】：样品可以被转移到荧光试管使用荧光仪测量。如果需要超过200 μL体积测量，等比例放大配置方案。
表1：PikoOrange对不同化学物质的耐受性
| 化合物 | 承受浓度峰值 |
| SDS | 0.01% |
| Triton X-100 | Below 0.001% |
| Tween 20 | Below 0.001% |
| CHAPS | Below 0.001% |
| Sodium deoxycholate (DOC) | Below 0.001% |
| Urea | 10 mM |
| DTT | 100 mM |
| beta-ME | 0.1% |
| Ammonium sulfate | 1 mM |
| Sodium azide | 2 mM |
| Imidazole | 50 mM |
| DNA | 10ug/mL |
| EDTA | 1mM |
| Sucrose | 10 mM (0.34%) |
| Glycerol | 1% |
| PBS | 0.02X |
| NaCl | 1 mM |
| CaCl2 | 0.01 mM |
| MgCl2 | 0.2 mM |
表2：准备BSA样品制作标准曲线
| BSA体积 | 工作液体积 | BSA 终浓度（μg/mL） | ||
| A | 5 μL BSA std (2 mg/mL) | 995 μL | 10 | |
| B | 250 μL solution A | 250 μL | 5 | |
| C | 250 μL solution B | 250 μL | 2.5 | |
| D | 200 μL solution C | 300 μL | 1 | |
| E | 250 μL solution D | 250 μL | 0.5 | |
| F | 250 μL solution E | 250 μL | 0.25 | |
| G | 100 μL solution F | 150 μL | 0.1 | |
| H | 0 μL solution G | 250 μL | 0 | |
 图1：PikoOrange比NanoOrange有更好的线性和重现性 | ||||
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