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上海稳转株构建
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上海申知心生物科技有限公司（简称“申知心生物”），是一家“提供全面、系统、高质量的心血管相关疾病研究服务平台”的创新型企业，致力于搭建基础医学和临床转化服务体系并开展基于药效学评价的临床前CRO服务，提供各种成熟的心血管疾病模式动物。公司投资建立的动物实验中心，建有清洁级、SPF级动物实验室，面积约1800平米。为科研院所、临床科室及医药企业提供专业定制化的动物模型、药物筛选、药理药效评价、安全性评价、病理分析及分子生物学检测等服务。
申知心生物拥有专业的技术团队，核心成员来自中科院、复旦、交大、同济等国内重点高校及科研机构，并与心血管病研究所保持密切合作，能够提供完善的实验技术咨询与服务。
详细信息
上海稳转株构建
一、详细介绍
上海稳转株构建常规转染技术可分为两大类，一类是是瞬时转染，一类是稳定转染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中、虽然可以达到高水平的表达，但通常只持续数天，在转染后24-72小时内（依赖各种不同的构建手段）分析结果，常常用到一些报告基因系统如荧光蛋白，β-半乳糖苷酶等来帮助检测。稳定转染则是外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白，需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒。建立稳定转染细胞系时，需根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶细胞进行筛选，常见的抗性标志物有潮霉素（hygromycin）、嘌呤霉素（puromycin）和新霉素（neomycin）。筛选得到的细胞能够稳定表达目的蛋白，可以用于目的蛋白的扩增和富集，或者得到稳定沉默特定基因的细胞株。
二、服务项目及周期
服务编号 | 项目名称 | 周期（工作日） |
SCL001 | 载体构建及鉴定 | 10-14 |
细胞转染及筛选 | 15-20 | |
细胞单克隆化培养 | 20-30 | |
RT-PCR、WB检测 | 15 | |
实验报告整理 | 2 |
