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G2380 ATPase染色液(钙钴法)/染色剂
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北京索莱宝科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。
总部位于北京,并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,拥有专业的研发和质量检测团队以及*的仓储和物流系统。“Solarbio”已经得到全国科研工作者的认可,成为广大经销商推崇的。
公司拥有一批专业的研发人员,我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广,品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时,索莱宝公司提供各种常规生化试剂,库存常备产品多达10000多种,可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面,索莱宝谨记公司信念:质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程,科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序,我们恪守对每一位用户的承诺:用专业的态度做专业的品牌。同时,公司组建了一支专业的技术服务队伍,能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买索莱宝产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
索莱宝公司坚持与接轨,注重和*企业的合作与交流,并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多合作,不断为广大生物科研工作者提供更优质的产品和服务。公司理念:“为科研服务,为生命尽责”。一个人能够走多远,取决于与谁同行。索莱宝公司期待与各同行精诚合作。
索莱宝诚招生物试剂研发人员,期待与广大同行精诚合作,为广大科研工作者提供优质的产品,高效的物流以及专业的售后服务。索莱宝感谢所有朋友的支持与帮助,您的支持是我们前进的动力和保障。让我们携手同行,共同创造美好的明天。
2016年索莱宝获得*认证。
ATPase染色液(钙钴法)/染色剂
产品货号:G2380
供应商:Solarbio
产品规格:5×50ml/盒
有效期:6 个月有效
ATPase染色液(钙钴法)/染色剂 试剂盒组成:
试剂(A): 碱性预孵育液 50ml RT 避光
试剂(B): 酸性预孵育液 50ml RT
试剂(C): ATPase 孵育液 50ml 4℃ 避光
试剂(D): 硝酸钴溶液 50ml RT
试剂(E): ALP 硫化溶液 2×1ml RT 避光
试剂(F): ATPase 对照液 10ml 4℃ 避光
ATPase染色液(钙钴法)/染色剂产品说明 :
三磷酸腺苷酶( adenosine triphosphatase,ATPase)是一种水解酶,是催化 ATP 合成的一种酶。三磷酸腺苷酶根据所用激活剂、抑制剂以及酶定位的不同分为膜性三磷酸腺苷酶、肌球蛋白三磷酸腺苷酶、线粒体三磷酸腺苷酶等。ATPase 能水解三磷酸腺苷为磷酸腺苷和磷酸,此酶只作用于磷酸与磷酸之间的高能键,因而释放大量能量。其催化反应如下:A-P-P-P + H 2 O→A-P-P + H 3 PO 4 +能量。
ATPase染色液(钙钴法)/染色剂原理在于三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷为二磷腺苷和磷酸,磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀,再依次被置换为磷酸钴和硫化钴,终产物为黑色硫化钴沉淀。
ATPase染色液(钙钴法)/染色剂操作步骤( ( 仅供参考) ) :
1. 冰冻切片直接入蒸馏水。
2. 一张切片入碱性预孵育液室温孵育 15min。另一张切片入酸性预孵育液室温孵育 5min,再入碱性预孵育液 30s。
3. 切片同时入 ATPase 孵育液,孵育 30-45min。
4. 1%氯化钙洗三次,每次 1min。。
5. 入硝酸钴溶液 3min,蒸馏水充分洗 4-5 次,流水冲洗 2min。
6. 在上述过程中配制 ALP 硫化工作液,即取试剂(E)用蒸馏水稀释 50 倍, 即为 ALP 硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液孵育 1-2min。
7. 流水洗 10min 后,入蒸馏水。
8. 切片经 95%乙醇溶液及无水乙醇脱水。二甲苯透明,树胶封片。
ATPase染色液(钙钴法)/染色剂染色结果:
酶所在阳性部位 黑色硫化钴沉淀
肌纤维分型:
肌纤维分型 碱性预孵育液 酸性预孵育液
Ⅰ型 + +++
ⅡA 型 +++ -
Ⅱ B 型 +++ -
Ⅱ C 型 +++ ++
阴性对照(可选):
1、取对照切片,用试剂(F)-ATPase 对照液进行孵育,并与用 ATPase 孵育液孵育的切片进行比较。
两者反应相同部位可能有非特异性磷酸(单酯)酶存在,两者不同部位才是 ATP 酶活性所在。
2、将切片入 80℃蒸馏水 10min,再与其他组织切片同时孵育,结果应为阴性。
注意事项:
1. 切片入孵育液前后不可用水冲洗。
2. 若要显示肌肉 ATPase 新鲜组织必须速冻后切片。
3. 若要鉴别肌纤维所属类型,好用连续冰冻切片。应减少切片在室温暴露的时间。
4. ALP 孵育液、ALP 硫化液易失效,好分成小份储存,一经开启立即使用。
5. ALP 硫化液具有腐蚀性和刺激性气味,应小心操作。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。