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SP0041 通用SP检测试剂盒 免疫组化试剂盒
- 型号
- SP0041
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北京索莱宝科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。
总部位于北京，并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及*的仓储和物流系统。“Solarbio”已经得到全国科研工作者的认可，成为广大经销商推崇的。
公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，索莱宝公司提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，索莱宝谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买索莱宝产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
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2016年索莱宝获得*认证。
详细信息
通用SP检测试剂盒 免疫组化试剂盒
品牌：Solarbio
货号：SP0041
别名 : 通用SP试剂盒 通用SP免疫组织化学试剂盒 通用SP超敏免疫组化试剂盒
规格：3ml；6ml；18ml
通用SP检测试剂盒 免疫组化试剂盒产品简介：
本试剂盒适合于一抗为小鼠/兔 IgG 的免疫组化实验 DAB 显色。
SP 试剂盒是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（PI=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，因此基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。
操作步骤:（以石蜡切片为例）
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲苯，三次乙醇)。
2. 3% H2O2 室温处理 5-10 分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗 3 次。
3.可选步聚：
a、热修复抗原，将切片浸入 0.01M 柠檬酸钠缓冲液（PH6.0），电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔 5-10 分钟后，反复 1-2 次。冷却后 PBS（pH7.2-7.6）洗涤 1-2 次。
b、酶消化，滴加消化液，37℃10 分钟，PBS（pH7.2-7.4）洗涤 2-3 次。
c、跳过此步，直接进入下一步。
4. 滴加封闭液，室温 20 分钟。甩去多余液体，免洗。
5. 用稀释液将一抗按一定比例稀释（稀释后的一抗 4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗 37℃ 孵育 1 小时左右或 20℃ 2 小时左右，也可 4℃过夜。PBS（pH7.2-7.4）洗涤 3次，每次 2 分钟。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）
6． 根据用量，用稀释液将 Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 浓缩液按 1:100 稀释成工作液(1ml 稀释液加入 10ulBio-羊抗小鼠/兔 IgG 浓缩液混匀，此工作液 4℃可保存一周)。滴加 Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 工作液，20-37℃ 孵育 30 分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗涤 3 次，每次 2 分钟。
7．根据使用量，用稀释液将链酶亲和素-POD 浓缩液按 1:100 稀释成工作液(1ml 稀释液加入 10ul链酶亲和素-POD 浓缩液混匀，此工作液 4℃可保存一周)。滴加链酶亲和素-POD 工作液，20-37℃，30 分钟。PBS （pH7.2-7.4）洗涤 4 次，每次 5 分钟。
8．DAB 显色：根据用量，用 PBS（pH7.2-7.4）配制，按 1ml PBS 加入 50ul 20×DAB 显色液 A，加入 50ul 20×DAB 显色液 B 。充分混匀后滴加到切片上。室温显色，镜下控制反应时间，一般在 5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9．苏木素轻度复染。脱水，透明，封片。显微镜观察。对于细胞爬片，固定后，PBS 漂洗两次，再用 0.5% Triton X-100 室温孵育 20 分钟，PBS 漂洗两次，3% H2O2 处理 15 分钟；PBS 漂洗两次，接上述第 4 步。对于冰冻切片，固定后，PBS 漂洗两次，接上述第二步。
注意事项：
如果染色背景过高，在 SP 反应之后，DAB 显色之前，用加有 0.01—0.02% TWEEN-20 的 PBST（pH7.2-7.4）洗涤切片 4 次，PBS 洗 2 次，然后 DAB 显色。
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