一、概要

    维生素B₁₂作为痕量元素，生物上属于重要的螯合物膜剂，由含钴的卟啉环作为中心原子组成，钴是由4个氮原子、一个氢和一个二甲基苯并咪唑组成。维生素B₁₂，为稳定的复合物，在胃酸里一种所谓的内源因子帮助下，被小肠下部分吸收。维生素B₁₂缺乏会导致恶性贫血，这种疾病不是由于维生素B₁₂供给不足，而是因为缺乏内源因子。恶性贫血者可服用高剂量的维生素B₁₂。

现有的检测程序主要是微生物方法（1），但也有高效液相色谱法和薄层色谱法，这些需要高量的时间和仪器。

本检测试剂盒定量检测维生素食品（2）中的维生素B₁₂，要比传统的微生物分析法（24-48小时）更快，包含样品预处理只需2.5-4个小时。

二、检测原理

    维生素B₁₂定量测试基于酶联免疫吸收分析原理。针对维生素B₁₂的抗体约束在酶标板上。样品维生素B₁₂和维生素B₁₂过氧化物酶结合物加到酶标板孔中。标记的酶和游离维生素B₁₂竞争抗体结合位点。在室温下培育一小时后，用稀释的洗涤液洗孔，去掉未结合物。加入培养基溶液，培育20分钟，变成蓝色。加入停止液抑制颜色发展，颜色变成了黄色，ELISA读数器测量黄色，维生素B₁₂浓度间接的和测试样品颜色强度成比例。