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茁彩生物 Von kossa染色 外包服务
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一、 实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗,蒸馏水洗三遍。
2、硝酸.银反应:切片滴加硝.酸.银溶液,用紫外灯连续照射2-3小时,蒸馏水洗多遍;
3、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。
4、伊红染色:85%、95%的酒精梯度脱水各5min,入伊红染液5min;
5、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
6、显微镜镜检,图像采集分析。
二、染色判读:
钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,细胞核呈蓝色,背景呈红色。
三、注意事项:
1、硝酸.银溶液滴染前,切片必须用蒸馏水洗干净;
2、如果没有紫外灯,也可以用强太阳光照射。
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