上海青旗生物有限公司提供ATCC原代细胞，ATCC菌株代购，同时上海青旗生物新增细胞库，具有自己的研发细胞培养库，上千株细胞具有STR鉴定，开春大放送，*，同时还有好礼相送，具体欢迎咨询我们销售人员。。。。

SHEE人永生化食管上皮细胞|SHEE细胞已鉴定

【中文缩写】SHEE

【中文名称】 SHEE人永生化食管上皮细胞

【背景资料】 见细胞说明书

【产品来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系

"公司提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性，一般细胞培养PBS量是10%，如果出现细胞状态不良情况，可以提高PBS量到15%，SHEE人永生化食管上皮细胞待细胞稳定后，调回PBS量10%，对于初次实验者，一般细胞培养，都需要加入双抗防止细胞污染，细胞汇合度达到90%，我们开始寄送，这样可以保持细胞收到时，良好的细胞活力。

一、售前
         上海青旗生物专业为国内科研提供高品质细胞和优质服务，QC检测合格后发货保证细胞状态良好，发货前保证质量。
 
二、售后
         收到细胞7天内出现状态不佳等情况请及时反馈，会有技术同步指导操作协助解决，如仍未养活免费重发。建议及时保种，有备无患！
 
三、细胞生长条件：

 
四、细胞收到后处理
    细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满*培养液并封好瓶口是细胞运输的zui好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的*培养液移入废液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培养液，悬浮细胞需离心处理，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。
 
五、细胞培养步骤
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中，加入约6ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
1、贴壁细胞，传代参考如下：
①. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
②. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
③. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
 
④. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

SHEE人永生化食管上皮细胞|SHEE细胞已鉴定 
2、悬浮细胞，传代参考如下：
方法①：收集细胞，1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心5分钟，去除上清，按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
 
   刚收到细胞时，胎牛血清可以用15%培养两三天，利于细胞尽快恢复状态，细胞稳定后
再调回10%即可
   收到细胞后如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要参考依据，请您务必重视。