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犬IL-10细胞因子elisa试剂盒
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犬IL-10检测试剂盒(ELISA)
犬IL-10检测试剂盒产品详细
中文名称 | 犬IL-10检测试剂盒(ELISA法) |
英文名称 | RayBio® Canine IL-10 ELISA Kit |
产品货号 | ELH-IL-10 |
产品规格 | 96T |
检测样本 | 血清、血浆、细胞培养上清液 |
适应物种 | 犬 |
预期用途 | 定量测定犬血清、血浆和细胞培养上清液中的IL-10的含量 |
产品品牌 | 美国RayBio |
供应商家 | 深圳市科润达生物工程有限公司 |
犬IL-10试剂盒预期用途
RayBio®犬IL-10细胞因子elisa试剂盒采用体外酶联免疫吸附测定法,定量测定犬血清(犬IL-10浓度在正常血清/血浆中较低,并且在该测定中可能检测不到)血浆和细胞培养上清液中的IL-10的含量。
犬IL-10检测试剂盒检测原理
犬IL-10细胞因子酶联试剂盒使用包被有犬IL-10特异性抗体的96孔酶标板,标准品和样品被加入到孔中,样品中存在的IL-10通过固相的抗体与孔结合。洗涤后加入生物素化的抗犬IL-10抗体。 洗去未结合的生物素化抗体后,将HRP-标记的链霉素加入到到孔中。 再次洗涤板孔,向孔中加入TMB底物溶液,底物显色与所结合的IL-10量成比例。 加入终止液颜色从蓝色变为黄色,并且在450nm处测量颜色的吸光度值。
犬IL-10检测试剂盒组成成分
组分 | 表述 | 储存/预准备后稳定性 |
IL-10酶标板(项目A) | 12*8=96孔,包被有抗小鼠IL-10抗体 | 4℃ 1个月 |
浓缩洗涤液(20x)(项目B) | 20x浓缩溶液 25ml | 4℃ 1个月 |
标准蛋白(项目C) | 2瓶小鼠IL-10。1个小瓶就够配制每个一式两份的标准品。 | -80℃1周 |
检测抗体IL-10(项目F) | 2瓶生物素化的抗小鼠IL-10。 每个小瓶足以测定微板的一半。 | 4℃ 5天 |
浓缩HRP-链霉亲和素(项目G) | 200μl 350X浓缩HRP缀合链霉亲和素 | 不能保存和重新使用 |
一步法TMB底物(项目H) | TMB溶液12ml | N/A |
终止液(项目I) | 8ml 0.2M硫酸 | N/A |
测定稀释剂D(项目K) | 15ml 5X浓缩液 | 4℃ 1个月 |
测定稀释剂B(项目E) | 15ml 5X浓缩液 | 4℃ 1个月 |
将未使用的板条重新装回到含有干燥剂包的袋中,沿着整个边缘重新密封。 |
试剂盒存储条件
犬IL-10细胞因子elisa试剂盒可在-20°C下保存,从装运之日起存放可长达1年。 避免反复冻融循环。 试剂盒可以在4℃下储存长达6个月。 对于更长时间储存时,建议储存在-80°C。 该试剂盒组分见下表。
犬IL-10检测试剂盒检测步骤
1.使用前将所有试剂和样品置于室温(18 - 25ºC)。建议所有标准和样品至少重复一次。
2.根据您的实验标记可拆卸的8孔条。
3.分别加入样品和每个标准品100μl(参见试剂制备步骤3)到适当的板孔中。盖上盖子,室温温和振荡孵育2.5小时
4.弃去溶液,用1X洗涤液洗涤4次。使用多通道移液器或自动洗板机洗板,每孔加入洗涤缓冲液(300μl)。每个步骤中去除液体对于良好的性能是至关重要的。洗完后,通过吸取或倾析清除任何剩余的洗涤缓冲液。倒置板并用干净的吸水纸吸干印迹。
5.每孔加入100μl1X制备的生物素化抗体(试剂制备步骤6)。在室温下温和振荡孵育1小时。
6.弃去溶液。重复洗涤,如步骤4。
7.加入100μl制备的链霉亲和素溶液(见试剂制备步骤7)。在室温下温和摇动孵育45分钟。
8. 弃去溶液。 重复洗涤,如步骤4。
9.向每个孔中加入100μlTMB一步底物试剂(项目H)。在室温下在黑暗中轻轻振荡孵育30分钟。
10.向每个孔中加入50μl终止液(项目I)。 立即读取450 nm处吸光度值。
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