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HepG2细胞 HepG2人肝癌细胞/STR鉴定
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镜像绮点（上海）细胞技术有限公司（子公司赛百慷）( Cellverse（iCell） Bioscience Technology Co., Ltd. )是一家专注于研发生产高品质原代细胞、细胞系、干细胞以及相关生物学试剂，并提供专业生物医学技术服务外包的高新技术企业，公司总部位于上海。
镜像绮点专注于研发生产高品质的人体组织源及动物组织源的原代细胞、细胞系、iPS细胞等产品，提供以及相关的CRO，CMO服务，同时也为客户提供相关培养体系，培养基等试剂。在中国，镜像绮点除与中国科学院细胞库合作外，还与各地医学学院、机构、药企合作，其中包括:上海交通大学医学院，复旦大学医学院。
目前，镜像绮点已经建立起先进完备的“人类组织源原代细胞库和细胞系库”两大细胞资源库，各种种属源细胞株(系)500多种，原代细胞包括人源、鼠源、兔源、猪源、羊源以及其它动物源近700多种，3000多株现货，引进了生命科学领域的全套实验设备，建立了先进的生产研发实验室，采用了先进的行业技术标准、制造工艺、质检流程，保证了产品出厂的品质，公司同时更注重产品售前与售后的技术服务，着重满足客户的需求与体验。还申请了相关细胞培养试剂等十几项zhuan利产品。正是凭借原有的原代细胞领域原创技术的优势，镜像绮点（上海）细胞技术有限公司，已经成为国内外众多生物医药企业诚信的合作伙伴和坚强的技术后盾。
镜像绮点（上海）细胞技术有限公司
上海市奉贤区茂园路260号临港南桥科技城56号楼7层
详细信息
HepG2人肝癌细胞/STR鉴定
细胞介绍
该细胞系来自15岁男性白人的组织。形态为上皮形，模式染色体数为55，在免疫抑制小鼠中不致瘤。
细胞特性
1） 来源：肝细胞癌
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途：仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的wan全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的wan全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
HepG2人肝癌细胞/STR鉴定
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备MEM（推荐iCell-0012）培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
培养注意事项：1. hepg2细胞复苏或传代后会有少部分的细胞贴壁和部分悬浮的细胞，复苏两天后细胞会从贴壁细胞向外开始生长，有时细胞再生长过程中，细胞会再贴壁细胞的上方生长，形成不同的细胞层，这种情况会有发生。 在细胞复苏的一周内，培养瓶中 通常会有悬浮的活的细胞团，在换液过程中不要丢弃在这些活的悬浮细胞，可以通过离心（125×g）回收细胞，重新打回到培养瓶中，分离或者丢弃漂浮的活细胞会使细胞数量变少，引起细胞的停滞生长或细胞死亡。
2.培养条件的细微变化，尤其是pH和培养基中血清的质量，可能会影响细胞的生长状况，在细胞的生长过程中会有细胞内的液泡出现，特别在细胞快要融合是会出现这种情况。培养细胞时使用未被灭活的高质量、低内毒素的胎牛血清，可以使细胞更好的贴壁和形成单层细胞。
3. 细胞在生长过程中可以通过将血清浓度提到到20%来改善细胞生长缓慢的情况。（参考atcc 有关该细胞的描述）
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mLwan全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，wan全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8mlwan全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达70%-90%，即可进行传代培养。
该细胞为轻微贴壁和少量悬浮培养细胞，传代可以参考以下方法：
1. 收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
2. 加入0.25％（w / v）yi蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的wan全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3） 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例；
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
