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pHyVec4
初级会员第8年
经销商上海谷研实业有限公司主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的销售,主营产品:生化试剂、试剂盒、ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白、生化检测试剂盒、分光光度法检测试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒、细胞株、原代细胞、细胞培养基、标准溶液产品。销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司产品。
公司客户遍布大学、研究所、医院、卫生、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。
公司主推品牌: (进口、国产) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。
质粒名称:pHyVec4
质粒规格:2ug
实验步骤:
1)质粒提取
1.10,0001min离心收集1.5-5ml菌液沉淀于1.5ml离心管中
2.加入100溶液1,振荡至*悬浮
3.加入200溶液2,立即轻柔颠側离心管6次,使菌体充分裂解,随后将离心管冰上放置
3分钟
4.加入150山溶液3,立即温和颠倒离心管数次,冰上放置3分钟,10,00g离心10mins
5.将步骤4的上清转移至新的离心管(尽量去除杂质),加入等体积的苯酚/氖仿/异成醇混
合均匀10,000离心5min
将步骤5的上清转移至新的离心管,加入2倍体积的无水乙醇,室温放置5-1omin,沉
降DNA
7.10000g离心10分钟,弃乙醇,保留沉淀,加入1ml706的乙醇洗涤沉淀,10,000离
心5分钟
8.倒掉乙醇溶液,用吸水纸吸净管壁上的水珠,室温蒸发痕量乙醇
9.加入适量含 Rnase的TE或灭菌双蒸水溶解质粒DNA
2)质粒鉴定琼脂糖礙胶电泳
灌胶:胶中加入芡光染料〈 SYBR Green)
加样:质粒+上样緩冲液→混匀
电泳
结果观察:UV灯下
pHyVec4实验分析:
裂解细胞中除含有质粒DNA外,还含有基因组DNA、各种RNA、蛋白质和脂类等物质,因
用碱裂解法除去杂质
1、防止DNA裂解: Solution1
1)、所含糖增加溶洨黏度,維持渗透压,防止DNA受机械剪切作用降解
100389-200301 间苯二酚 含量测定 50mg
100390- 200502 维生素B1 含量测定 100mg
维生素BT 含量测定 100mg
100394-200401 乙水杨胺 含量测定 100mg
100396-200301 枸橼酸 含量测定 200mg
100398-200701 丹蒽醌 含量测定 100mg
100399-200601 氢溴樟柳碱 含量测定 100mg
100401-200501 顺铂 含量测定 100mg
100407-200301 棓丙酯 含量测定 50mg
100408-200401 氯美扎酮 UV法溶出度检查 100mg
100410-200301 磷酸氢钙 UV法含量测定 100mg
100411-200501 磺胺二甲嘧啶 含量测定 100mg
100412-200401 磺胺脒 HPLC法含量测定 100mg
100413-200601 磺胺醋酰胺 鉴别 100mg