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Phos-tag™ 凝胶荧光染料
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生产厂家Phos-tag™ 凝胶荧光染料
Phos-tag™ 凝胶荧光染料,是一种可在生理pH范围内,对凝胶中的磷酸化蛋白进行染色的荧光染料。进行了SDS-PAGE,用本产品处理聚丙烯酰胺凝胶,可以对磷酸化蛋白进行特异性染色。
本系列有波长不同的Yellow(黄)、Magenta(品红)、Cyan(蓝绿)、Aqua(浅绿)四种颜色。每管规格为0.2 mg,可对约20个迷你凝胶进行染色。
购买前请注意:
使用Phos-tag™ 凝胶荧光染料,需要用到Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5×(产品编号:383-15231)。请一同购买。
◆特点
● 高灵敏度
● 在生理pH下即可染色
● 选择性与pSer、 pTyr、 pHis以及pAsp残基结合
● 无需放射性物质、化学物质标签、抗体
● 2小时内完成染色
◆产品对比
其他公司产品A
● 凝胶pH:2~4 ● 5个步骤(固定、清洗、染色、脱色、清洗) ● 所需时间:≧5小时 ● 溶液更换次数:11次 ● 卵清蛋白检测上限:~5 ng/lane | Phos-tag™ Magenda(品红)
● 凝胶pH:7~8(不进行脱磷酸化) ● 3个步骤(固定、染色、清洗) ● 所需时间:≦2小时 ● 溶液更换次数:4次 ● 卵清蛋白检测上限:~1 ng/lane |
◆应用实例①
磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白的染色Phos-tag™ Aqua(浅绿)
Lane.No.()内为磷酸基团数目
1. Marker 2.α-酪蛋白(9P) 3.经ALP处理的α-酪蛋白 4.β-酪蛋白(5P) 5.经ALP处理的β-酪蛋白 6.卵清蛋白(2P) | 7.经ALP处理的卵清蛋白 8.胃蛋白酶(1P) 9.经ALP处理的胃蛋白酶 10.β-半乳糖苷酶 11.牛血清白蛋白 12.碳酸酐酶 |
Phos-tag™ Aqua(浅绿)染料选择性:用Phos-tag™ Aqua(浅绿)对10%(w/v)的PAGE胶进行染色,其中分别含有四组完整的以及经ALP(碱性磷酸酶)处理的磷酸蛋白(α-酪蛋白,β-酪蛋白,卵清蛋白和胃蛋白酶各1 μg)(左),然后使用考马斯亮蓝CBB G-250染色(右)。
成功特异性地检测出SDS-PAGE后的磷酸化蛋白。
数据提供:广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师
◆应用实例②
使用Phos-tag™ 荧光凝胶染料的组氨酸、天门冬氨酸的磷酸化分析
细菌通过将信息从组氨酸激酶EnvZ传递到应答调控子OmpR来调节基因的表达。分别分析有自磷酸化能力的EnvZ激酶和被EnvZ催化的OmpR中组氨酸和天门冬氨酸的磷酸化。
可以确认Phos-tag™ Magenta(品红)和Phos-tag™ SDS-PAGE 这两种试剂中的His和Asp的磷酸化随激酶的处理时间经过不断增强。尤其是使用Phos-tag™ Magenta(品红)时,可以仅检测出His磷酸化或Asp磷酸化。
数据提供:广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师
◆应用实例③
用于筛选组氨酸激酶抑制剂(新型抗生素)
使用Phos-tag™荧光凝胶染料,筛选组氨酸激酶抑制剂。
证实磷酸化依赖组氨酸激酶抑制剂浓度被抑制。
数据提供:广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师
参考文献
“Quantitativemonitoring of His and Asp phosphorylation in a bacterial signaling system byusing Phos-tag Magenta/Cyan fluorescent dyes”, Emiko Kinoshita-Kikuta, HiroshiKusamoto, Syogo Ono, Keisuke Akayama, Yoko Eguchi, Masayuki Igarashi, ToshihideOkajima, Ryutaro Utsumi, Eiji Kinoshita, Tohru Koike, Electrophoresis, 2019
◆使用方法
※调整平衡及清洗溶液以及染色溶液必须使用Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5× (产品编号:383-15231)。
◆激发波长/荧光波长
Phos-tag™ Yellow(黄) | Phos-tag™ Magenta(品红) |
Ex/Em=505 nm/514 nm | Ex/Em=547 nm/561 nm |
Phos-tag™ Cyan(蓝绿) | Phos-tag™ Aqua(浅绿) |
Ex/Em=643 nm/661nm | Ex/Em=551 nm/564 nm |
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
380-15241 | Phos-tag™ 黄色荧光染料 | 0.2 mg |
386-15221 | Phos-tag™ 品红荧光染料 | 0.2 mg |
382-15201 | Phos-tag™ 浅绿荧光染料 | 0.2 mg |
389-15211 | Phos-tag™ 蓝绿荧光染料 | 0.2 mg |
383-15231 | Phos-tag™ 5×染色通用混合溶液 | 1 EA |
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用于Bio-Rad伯乐电泳仪
货号 | 品名 | 电泳仪 | 规格 |
198-17981 | SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 7.5%, 17 well, 83×100×3.9mm | Mini-PROTEAN® Tetra Cell (Bio-Rad Laboratories, Inc.) | 5 块 |
195-17991 | SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well, 83×100×3.9 mm | 5 块 |
用于Life Technologies伯乐电泳仪
货号 | 品名 | 电泳仪 | 规格 |
192-18001 | SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 7.5%, 17 well, 100×100×6.6 mm | XCell SureLock® Mini-Cell (Life Technologies, Inc.)
| 5 块 |
199-18011 | SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well, 100×100×6.6 mm | 5 块 |
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产品编号 | 产品名称 | 规格 |
302-93561 | Phos-tag™ 琼脂糖 | 0.5 mL |
308-93563 | 3 mL |
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产品编号 | 产品名称 | 规格 |
387-07321-8P | Phos-tag™ 琼脂糖枪头 | 8 pcs |
387-07321 | 8 pcs×10 |
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产品编号 | 产品名称 | 规格 |
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