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弯曲菌（CSPP）多重PCR检测试剂盒
汇智和源从汇智泰康独立而来，“IPHASE”为核心产品品牌，公司致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的试剂产品，品牌宗旨“Innovative Reagents for Innovative Research”。
公司主要产品：ADME产品，空白生物基质，遗传毒性产品，重组蛋白，抗体，原代细胞，分选细胞等。
详细信息
产品说明
CSPP多重PCR检测试剂盒可同时检测空肠弯曲菌(C. jejuni)，结肠弯曲菌(C. coli)，海鸥弯曲菌(C. lari)，乌普萨拉弯曲菌(C. upsaliensis)，和胎儿弯曲菌胚胎亚种(C. fetus subsp. fetus)等5种常见的弯曲菌属致病细菌。
产品组成 （50次，20 µL PCR）
组分 | 数量 | 体积 |
Master Mix （2X） * | 1管 | 500 µL |
Primer Mix | 1管 | 200 µL |
阳性对照 | 1管 | 50 µL |
H2O | 1管 | 1 mL |
* Master Mix （2X）含有Taq DNA聚合酶， dNTP，含MgCl2的PCR优化反应缓冲液，以及电泳时所必需的色素试剂。使用频率高时一旦融解请于4oC保存或分装保存。
储存条件
-20oC长期保存。多次反复冻融会降低检测效率。
使用说明
- DNA样本处理、反应体系配制、核酸扩增和结果鉴定等各步骤应分域进行，以避免交叉污染。
- 细菌基因组DNA可使用市售试剂盒提取，也可按以下方法快速制备：
- 从平板上挑取适量菌落，加入含有200 µL ddH2O的灭菌离心管中，涡旋震荡混匀，肉眼可见菌液浑浊即可。
- 菌液煮沸10 min，冷却至室温后，13,000 rpm离心2 min。
- 将上清移至新离心管中，即得可用于本试剂盒检测的细菌DNA模板。
- PCR反应液配制：
2 X Master Mix 10 µL
Primer Mix 4 µL
阳性对照/样品DNA 2 µL
H2O 4 µL
反应终体积 20 µL
- PCR反应条件：
95oC 预变性 6 min
95 oC 变性 30 sec
30个循环 59 oC 复性 30 sec
72 oC 延伸 30 sec
72 oC 延伸 7 min
- 琼脂糖凝胶（2%）电泳检测15 µL PCR扩增产物 (100 V，50 min)。5种弯曲菌属细菌的检测结果如下图所示，其中23S rRNA作为扩增反应的内参照，在所检测的5种弯曲菌属细菌均应可见其大小为650 bp的扩增片段。阳性对照应可见6条大小不同的扩增片段。
- 注意事项：
试剂使用前建议短暂离心后开启。
PCR反应液请在冰中配制，以增强检测的特异性。
本试剂盒中Master Mix包含电泳所必需的试剂，PCR反应后可直接电泳。
