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茁彩生物 外包服务 Tunel
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生产厂家上海茁彩生物科技有限公司,以为生命科学工作者提供*高水准的产品及技术服务为经营宗旨,有别于众多国内企业单纯代理贸易的简单运营模式,更加强调技术的掌握和优化。强调良好的售后服务和技术支持,努力打造中国。
上海茁彩生物科技有限公司,是一家专注于免疫检测类试剂的高科技生物公司,主营产品为主营产品为ELISA试剂盒、荧光定量PCR试剂盒、蛋白、抗体和其他配套试剂。
上海茁彩生物科技有限公司,可以外包诸多染色实验,样本不仅含有基础的动物组织切片,还包括植物叶片、动物细胞、骨片、脑片、皮肤等特殊样本。染色种类多,染色方法全,石蜡染色,冰切染色均可操作。同时,我公司还可以承接整体实验项目,细胞实验项目,包括样本的造模,细胞的培养,已经后续细胞的增殖、细胞粘附、细胞划痕等实验.
上海茁彩生物科技有限公司,一直坚持质量的稳定是生存的根本,我们更注重高品质的服务,把每一个客户当做自己事业上的伙伴!
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冰冻切片tunel实验步骤
1、 冰冻切片固定:冰冻切片从冰箱拿出来复温,晾干水分,冷丙酮固定10min,待丙酮*干后于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
2、 修复:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止液体流走),在圈内滴加蛋白酶K工作液(蛋白酶K储存液用PBS 1:9稀释)覆盖组织,37度温箱孵育30min。将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
3、 破膜:切片稍甩干后在圈内滴加破膜工作液覆盖组织,常温下孵育20min,将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
4、 加试剂1,2:按片子数量和组织大小取tunel试剂盒内适量试剂1 (TdT) 和试剂2(dUTP)按2:29混合(试剂1,2为现配现用),加到圈内覆盖组织,切片平放于湿盒内,37℃恒温孵育2小时,湿盒内加少量水保持湿度。
5、 阻断内源性过氧.化物酶:将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片放入用甲醇配制的3%过氧.化氢溶液(过.氧化氢:甲醇=1:9)室温避光孵育15 min,将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
6、 加试剂3:切片稍甩干后,每张切片加适量试剂3(converter-POD)覆盖组织,切片平放于湿盒内,37℃温箱孵育30min。将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
7、 DAB显色:切片稍甩干后在圈内滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下控制显色时间,阳性为细胞核呈棕黄色,自来水冲洗切片终止显色。
8、 复染细胞核:Harris苏木素复染3min左右,自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。
9、 脱水封片:将切片依次放入75%酒精6min-85%酒精6min --无水乙醇Ⅰ6min -无水乙醇Ⅱ6min -二甲苯Ⅰ5min 中脱水透明,将切片从二甲苯拿出来稍晾干,中性树胶封片。
石蜡切片tunel实验步骤
1、 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸馏水洗。(冬天适当延长脱蜡时间)
2、 修复:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止液体流走),在圈内滴加蛋白酶K工作液(蛋白酶K储存液用PBS 1:9稀释)覆盖组织,37度温箱孵育30min。将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
3、 破膜:切片稍甩干后在圈内滴加破膜工作液覆盖组织,常温下孵育20min,将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
4、 加试剂1,2:按片子数量和组织大小取tunel试剂盒内适量试剂1 (TdT) 和试剂2(dUTP)按2:29混合(试剂1,2为现配现用),加到圈内覆盖组织,切片平放于湿盒内,37℃恒温孵育2小时,湿盒内加少量水保持湿度。
5、 阻断内源性过氧.化物酶:将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片放入用甲醇配制的3%过氧化氢.溶液(过氧.化氢:甲醇=1:9)室温避光孵育15 min,将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
6、 加试剂3:切片稍甩干后,每张切片加适量试剂3(converter-POD)覆盖组织,切片平放于湿盒内,37℃温箱孵育30min。将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
7、 DAB显色:切片稍甩干后在圈内滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下控制显色时间,阳性为细胞核呈棕黄色,自来水冲洗切片终止显色。
8、 复染细胞核:Harris苏木素复染3min左右,自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。
9、 脱水封片:将切片依次放入75%酒精6min-85%酒精6min --无水乙醇Ⅰ6min -无水乙醇Ⅱ6min -二甲苯Ⅰ5min 中脱水透明,将切片从二甲苯拿出来稍晾干,中性树胶封片。
上海茁彩生物科技有限公司,可以承接诸多病理实验,样本不仅含有基础的动物组织切片,还包括植物叶片、动物细胞、骨片、脑片、皮肤等特殊样本。染色种类多,染色方法全.石蜡染色,冰切染色均可操作,同时还可以承接整体实验项目,细胞实验项目,包括样本的造模,细胞的培养,以及后续细胞的增殖、细胞粘附、细胞划痕等实验.