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哺乳动物细胞蛋白表达系统
中级会员第5年
代理商安诺伦(北京)生物科技有限公司是一家创办于2015年的创新型高科技企业,公司由在国内科研试剂领域有着十几年从业经验的专业技术团队和企业管理团队组建而成,专门从事以抗体、蛋白、细胞、化学品为核心的试剂产品研发与销售。
自公司成立以来一直以“客户至上”为公司核心价值观,专注于为生命科学和生物技术领域的客户提供优质的产品和技术服务。本着始终拥有的服务热忱,安诺伦生物致力于成长为我国重要的生命科学试剂和成果转化一体化的前驱者、致力于成为中国大的科研试剂产品供应商之一。
Annoron——是安诺伦生物集科研试剂搜索、采购一体化网站平台,公司通过建立覆盖欧美的*,与欧美100多个品牌建立了正式的代理与合作,基本涵盖所有的生物试剂门类,特别是二三线高质量品牌产品,优势更大!
我们的优势:
1,覆盖欧美的*,总部设立在美国加州,采购团队有10多人,能进口涵盖抗体,蛋白,细胞,血清,耗材等的全门类生物产品。
2,货品多且全,目前,以我们美国公司为主体,与欧美100多个品牌建立了正式的代理与合作,基本涵盖所有的生物试剂门类,特别是二三线高质量品牌产品,优势更大!
3,现货库存,我们已经在北京和武汉建立了自营库存,并将逐步建立上海库存、成都库存、广州库存,目前涵盖100个门类,将近10000个现货产品!
4,期货提供加急服务,一般2-3周到货,超过时限加急费全免!
5,价格优势,依托我们一体化的整合优势,我们致力于提供竞争力的价格!
6,优质的信誉,我们的客户群包括*,清华大学,北京大学,复旦大学,南京大学等100多所大学;康龙化成,昭衍新药,美迪西,保诺生物,正大天晴等500多家公司!
我们的产品——
抗体类
• 一抗/二抗产品
• 标记一抗/二抗相关产品
• Elisa试剂盒,配对抗体
• 多种试剂盒,PCR试剂盒,DNA提取试剂盒,RT实时定量试剂盒
蛋白类
• 重组蛋白/天然构象蛋白
• 小分子抗原,细胞因子
• 多肽类
分子细胞类
• 肿瘤细胞/传代细胞/原代细胞
• 定制化的耐药细胞
• 高品质血清
• 常用培养基,分子细胞实验试剂
• 合成引物/载体/质粒
化学品与试剂
• 化学中间体
• 化学合成常用试剂
• 定制中间体合成
• 对照品/标准品
• 液相/气相色谱实验佐剂
欢迎您来电垂询,我们竭诚为您服务!
此致敬礼!
抗体: | 一抗,二抗,标记抗体,流式抗体,抗体血清 |
试剂盒: | Elisa试剂盒,PCR试剂盒,基因敲除试剂盒,Real-Time实时定量试剂盒,STR试剂盒 |
蛋白与多肽: | 重组蛋白,天然蛋白,多种肽段,多种属蛋白和抗原(动植物,细菌,病毒等) |
细胞产品: | 各种细胞株,种属多元化,细胞类型多样,肿瘤细胞,干细胞,星状细胞,传代细胞,原代细胞等 |
酶类: | 内切酶,蛋白酶,核酸酶,聚合酶 |
克隆/载体: | PCR克隆载体,细菌/病毒克隆载体,多种属的表达载体 |
血清/培养基: | 细胞实验常规培养基,澳洲胎牛血清,北美牛血清,高质量细胞实验相关试剂 |
常用试剂: | 对照品以及标准品,免疫组化常用试剂,免疫印迹常用试剂,常用显色试剂,细胞生物学试剂,气相色谱试剂,液相色谱试剂等 |
化学品: | 产品(提供结构或者CAS化学试剂,中间体,订制化学) |
引物/探针: | 依据序列三天支付结果 |
脂质体: | 常规产品常年现货 |
哺乳动物细胞表达系统的优势
1. 能实现翻译后修饰及正确的蛋白折叠复性;
2. 表达水平高;
3. 高效启动子控制蛋白表达
4. 适合大规模蛋白表达。
艾伯森生物哺乳表达系统
艾伯森生物提供表达载体构建、瞬时转染、表达测试及大规模动物细胞发酵和蛋白纯化等一站式蛋白技术服务。
表达载体:pcDNA 3.1,pIRES,pTT3,pCEP4,pATX1等常规载体以及我司分子技术人员自行合成与后期改造的性载体。
艾伯森生物哺乳表达系统服务内容
1. 载体构建及改进
1) 可将cDNA克隆至客户或艾伯森生物提供的哺乳细胞的表达载体中;
2) 可在表达载体中添加分泌信号肽和纯化标签,促进蛋白分泌表达及满足一步亲和纯化的需求;
3) 能生产并鉴定高效稳定细胞系,适合大规模发酵生产。
2. 稳定基因表达符合长期生存需求。整个实验操作流程提供长期稳定及规模可调的蛋白生产
3. 瞬时表达(TGE)
1) 与稳定基因表达相比,TGE主要适用于短期内制备重组蛋白,一般在10天内即可快速转染,无需质粒DNA的遗传性选择
2) 艾柏森生物的瞬时表达使用悬浮细胞,能够完成体积到100L的蛋白表达。
4. 工艺过程开发及扩大规模。艾柏森生物能够优化表达过程以及表达产物,检测细胞表达量,摸索发酵罐发酵条件,适合大规模发酵生产。
5. 纯化。艾伯森生物拥有完整的蛋白纯化系统,亲和纯化,凝胶过滤,离子交换及疏水层析等纯化方法,能够完成带标签与不带标签蛋白的纯化,以及纯化工艺的摸索。
服务流程
经典案例
某生物细胞器基质蛋白,全长334aa,大小37.03kDa,自带Fc标签蛋白,采用293F细胞表达。我们在对其编码基因进行全密码子优化后,把它构建到pTT3载体上,测序验证无误后,进行了30ml体积试表达,如Figure1:
Figure 1. Expression result .Coomassieblue staining.
MW. Molecular weight marker.Ø. Non-transfected (negative control).
目的蛋白的大回收率,我们先后对Flowthrough进行了两次Protein G纯化(Figure2~Figure3),可以看到在第二次纯化后,FT中尚残留的目的蛋白。
Figure2. Target protein purification profile.
Figure 3. Target proteinpurification profile.Reducing-PAGE analysis.
为此我们提高了盐浓度至300mMNaCl,这次洗脱后,FT中剩余的蛋白量显著降低,如Figure4.
Figure 5. Target protein purificationprofile. Coomassie blue staining.Reducing-PAGEanalysis.
再是表达摸索清楚成熟的实验条件后,我们进入大体积制备,2L发酵。
Figure 6. Target protein purification profile and QC gel.