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荧光定量pcr 多重荧光定量PCR预混液(含UDG)
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生产厂家企业简介
翌圣生物科技(上海)股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动,聚焦生命科学产业链上游核心原料,从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业,通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径,成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业,产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验,构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来,公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种,涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂,能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂,广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力,不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日,公司已经获得授权18项(其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项)和45项与生物试剂相关的软件著作权,拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标,是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新,翌圣生物积极开展“产学研”合作,与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作,优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础,建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台,目前已经自主研发出20项核心技术,打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径,覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地,配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时,公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证,从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督,保证产品过程的可控制性及可追溯性,竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可,为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系,公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值,让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值,让世界更健康更快乐”的使命,专注于技术创新和产品升级,不断拓展核心技术的应用领域,为客户提供更为的产品与服务,助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时,翌圣生物将进一步推进国际化战略,继续布局和拓展海外市场,为全球生物试剂产业发展贡献力量。
产品描述
多重荧光定量PCR预混液(含UDG)本产品是2×Mix预混合试剂,能够实现在单个反应孔中进行多达四重的荧光定量PCR反应。本产品含有基因改造的抗体法热启动Taq酶,极大地提高了扩增灵敏度和特异性。同时,本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化,能够提高反应的扩增效率,促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。本产品含有UDG酶,可有效防止气溶胶污染的风险。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | ||||
11212ES03 (1 mL) | 11212ES08 (5×1 mL) | 11212ES12 (12.5 mL) | 11212ES60 (20×5 mL) | 11212ES62 (125 mL) | ||
11212 | 2×Hieff Unicon® Universal TaqMan qPCR mix (UDG plus) | 1 mL | 5×1 mL | 12.5 mL | 20×5 mL | 125 mL |
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。
注意事项
一、关于操作
1)请于使用前确保产品*解冻并*混匀,短暂离心收集至管底后,置于冰上备用。
2)为避免样品间交叉污染和气溶胶污染,推荐在超净台中进行反应体系的配制。
3)使用过程中避免产品的反复冻融。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
二、实验方法
a) 引物设计
1. 引物必须具有特异性。
2. 引物的Tm值必须在58-60°C,而且各组引物的Tm差异应控制在1-2°C。
3. 引物的长度一般控制在15-30 bp之间。
b) 探针设计
1. TaqMan探针的Tm值要比对应的引物高约10°C(68-70°C)。
2. TaqMan探针和引物间不能形成二聚体。
反应体系f
组分 | 体积 (μL) | 终浓度 |
2×Hieff Unicon® Universal TaqMan qPCR mix (UDG plus) | 12.5 | 1× |
Primer mix (10 μM) | X | 0.1-0.5 μMa |
Probe mix (10 μM) | X | 50-250 nMb |
Rox reference dyec | 0.5 | 1× |
Template DNA/cDNAd | 1-10 | - |
ddH2O | up to 25e | - |
【注】:使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。
a) 引物浓度:Primer Mix中包含多对引物,通常每条引物终浓度为0.2 μM,也可以根据情况在0.1-0.5 μM间进行调整。
b) 探针浓度:Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-250 nM间调整。
c) Rox reference dye:使用在Applied Biosystems 等Real Time PCR 扩增仪上,用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差;本产品不含Rox reference dye。如需,推荐使用货号10200ES产品。
d) 模板稀释:qPCR灵敏度*,建议将模板进行稀释使用。若模板为cDNA原液,则模板体积不超过总体积的1/10;
e) 反应体系:推荐使用25 μL、30 μL或50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
f) 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
参考扩增程序
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
污染降解 | 25℃ | 10 min | 1 |
预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
变性 | 95℃ | 15 sec | 45 |
退火/延伸a | 60℃ | 30 secb |
【注】: a) 退火/延伸:温度和时间可根据实验要求适当调整。
b) 荧光信号采集:请按照仪器使用说明书要求进行实验程序设置,几种常见仪器的时间设定如下:
20 sec:Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 sec:Applied Biosystems 7300
32 sec:Applied Biosystems 7500
相关产品
产品名称 | 货号 | 规格 |
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix | 11211ES03/09/61 | 1 mL/5 mL/100 mL |
Hieff® anti-Taq DNA Polymerase Antibody Taq酶单克隆抗体 | 31301ES60/80/90/92/93/94 | 100 μg/1 mg/5 mg/10 mg/100 mg/1000 mg |
Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile 热敏UDG | 10303ES60/76/96/98 | 100 U/500 U/10000 U/100000 U |
dUTP, 100 mM Solution 脱氧尿苷三磷酸溶液(100 mM) | 10128ES72/80/96/98 | 250 μL/1 mL/25 mL/500 mL |
HB220224