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猪瘟抗体检测试剂盒使用步骤
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赛诺利康生物技术(北京)有限公司是一家位于北京市大兴区的高科技生物技术企业，公司集研发、生产、销售为一体，专业经营各种生物化学试剂、动植物疾病检测试剂盒,实验室检测仪器、实验室消耗品等，专业为客户提供食品安全、动植物疫病检测试剂盒、进口化学试剂产品及技术服务。
自公司成立以来，先后与国家疾病预防控制中心、中国检验检疫科学研究院等机构合作，致力于开发推广先进的生物技术相关产品，为广大客户提供优质服务。我们具有丰富的市场服务经验,高度的专业水平，快速准确的供货网络。为全国科研，教学及工业用户，提供产品和人性化的服务。我公司的经营范围遍及全国，主要面向政府检测机构、科研院所、大专院校以及食品工业领域,如生物制药、 酿酒、食品卫生及饮料等行业的企业客户。
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详细信息
猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
使用说明书
产品名称
通用名：猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
包装规格
96T×1/盒
检测原理
本试剂盒由预包被猪瘟病毒重组蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中猪瘟病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有猪瘟病毒抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶标结合物反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪瘟病毒抗体。
试剂盒组成
序号 | 名称 | 规格/96T×1 |
1 | 酶标记物 | 12ml×1(红盖) |
2 | 样品稀释液 | 22ml×1(黄盖) |
3 | 20X浓缩洗涤液 | 40ml×1(蓝盖) |
4 | 底物液A | 6ml×1(白盖) |
5 | 底物液B | 6ml×1(黑盖) |
6 | 终止液 | 12ml×1(黄盖) |
7 | 阳性对照 | 1.0 ml×1(红盖) |
8 | 阴性对照 | 1.0 ml×1(绿盖) |
9 | 酶标板 | 96T×1 |
10 | 封板膜 | 1 |
11 | 说明书 | 1 |
储存及有效期
2～8℃保存，有效期12个月。
包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。
适用仪器
含450nm波长的酶标仪，37℃恒温设备，可调微量移液器。
样品准备
1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
2.根据样本数量准备对应数量的小刻度EP管或血清稀释盘，用样品稀释液将待检血清按50倍稀释（如4μl血清加入196μl样品稀释液中，混匀）阴性、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水加1份浓缩洗涤液)。
检验方法
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条，设阴性、阳性对照各1孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀，盖好盖板膜，置37℃温箱孵育30分钟。
5.甩去孔内液体，每孔加250ul工作洗涤液，用震荡混匀的方式洗涤60秒后弃去，重复洗涤5次，每次洗涤后需拍干液体。
6.每孔加酶标记物100μl，置37℃避光反应30分钟。
7.甩去孔内液体，每孔加250ul工作洗涤液，用震荡混匀的方式洗涤60秒后弃去，重复洗涤5次，每次洗涤后需拍干液体。
8.根据样本数量将显色液A与显色液B按等体积比例混匀配置为底物工作液，现配现用。每孔加100ul，置37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液100μl，混匀，于450nm 测定各孔吸光值（OD值），
参考值
实验正常的情况下，阳性对照OD-阴性对照OD＞0.2。
检验结果的解释
1. S/P＝(样本OD-阴性对照OD)/(阳性对照OD-阴性对照OD)。
2. S/P≥0.4时结果判读为阳性。
3. 0.2＜S/P＜0.4时结果为疑似阳性；若接种过对应疫苗，则提示抗体水平不足，建议补打疫苗。
4. S/P＜0.2时结果判读为阴性。
试验方法的局限性
1. 本试剂盒仅作为定性检测猪血清、血浆中猪瘟病毒抗体的粗略评估。
2. 本试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验。
注意事项
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以*溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。
