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60231ES Aureobasidin A（AbA）金担子素A
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- 60231ES
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企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
详细信息
产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格
Aureobasidin A（AbA）金担子素A
60231ES03
1 mg (1 mg/mL)
838
60231ES08
5×1 mg (1 mg/mL)
2678
60231ES10
10×1 mg (1 mg/mL)
4675
产品描述
金担子素A，又名Aureobasidin A、AbA、Basifungin、短梗霉素A，是从丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分离出来的环酯肽类抗生素，是一种是一种环状肽、抗真菌的抗生素，具有很强的抗真菌能力，是肌醇磷酸化神经酰胺合成酶AUR1的抑制剂。在较低的浓度下(0.1-0.5 μg/mL)即可对酵母产生毒性。对其敏感的真菌种类包括：出牙酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)和黑曲霉(A. niger.)。作用机制是Aureobasidin A抑制了真菌生长所依赖的肌醇磷酰胺(inositol phosphorylceramide, IPC)合成酶的活性，干扰鞘脂合成，从而进一步杀死菌株。编码IPC合成酶的基因研究较多的有来自酿酒酵母菌的AUR1基因，以及构巢曲霉的AURA基因，两者具有同源性。通过对这些编码基因进行突变即可使得菌株对Aureobasidin A产生抗性，如AUR1-C基因。
Aureobasidin A非常适合用作阳性克隆子筛选用的药物选择性标记。Aureobasidin A抗性也是酵母单/双杂交研究中理想的报告子。本品为溶于甲醇的Aureobasidin A溶液，浓度为1 mg/mL。具体的工作浓度取决于宿主细胞的敏感度（见表1. AbA对各种酵母菌的低抑菌浓度(MIC)）。
表1 Aureobasidin A对各种酵母菌的低抑菌浓度
菌株
MIC（µg/mL）
S.cerevisiae
ATCC9763（diploid）
0.2-0.4
SH3328（haploid）
0.1
Sake yeast（diploid）
0.1-0.2
Shochu yeast（diploid）
0.1
Beer yeast（triploid or tetraploid）
0.1
Baker’s yeast（diploid）
0.2-0.4
Schizo.pombe
JY-745（monoploid）
0.1
C.albicans
TIMM-0136（diploid）
0.04
C.tropicalis
TIMM-0324（diploid）
0.08
产品性质
英文别名（English Synonym）
Aureobasidin A; AbA; Basifungin
中文名称 (Chinese Name)
金担子素; 金担子素A; 短梗霉素A
CAS号（CAS NO.）
127785-64-2
分子式（Formula）
C60H92N8O11
分子量（Molecular weight）
1101.42 g/mol
外观（Appearance）
液体溶液
纯度（Purity）
≥97%
溶解性（Solubility）
粉末易溶于DMSO和甲醇(0.5-10 mg/mL)；不溶于水
结构式（Structure）
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。建议分装后-20℃干燥保存，避免反复冻融。不建议4℃和常温下长期存放。
产品应用
1. 酵母双杂交研究
2. 酵母单杂交研究
3. 严格的酵母药物选择标记
4. Aureobasidin A抗性是酵母杂交研究的理想报告因子
操作步骤（抗AbA的酵母转化系统）
1. 加入0.5 mL过夜培养的酵母到50 mL YPD培养基中（配方：1 L液体培养基含有10 g yeast extract，20 g polypeptone，20 g D-glucose；固体培养基另外加入2%琼脂）。
2. 30℃培养约6小时，测定OD660为1-2。使用二倍体时，测定OD660为2-4。
3. 1,000×g离心5分钟。
4. 用10 mL Solution A（配方：100 mM Lithium acetate，10 mM Tris-HCl pH 7.5，1 mM EDTA）悬浮沉淀，1,000×g离心5分钟。
5. 用Solution A重悬沉淀，直到OD660为150。
6. 在管内分取100 µL细胞悬浮液，30℃培养1小时。
7. 加入5 µg载体（环状或线性DNA）和150 µg Carrier DNA（已经过100℃加热10分钟，并迅速冷却）。
注：pAUR101需使用线性DNA进行转化。使用环状DNA会降低转化效率甚至转化不成功。pAUR112和pAUR123需使用完整的质粒DNA进行转化。
8. 加入850 µL Solution B（配方：取40 g Polyethylene Glycol 4000溶于100 mL Solution A充分溶解，需要现用现配），轻轻混匀。
9. 30℃培养30分钟后，42℃培养15分钟。
10. 室温放置10分钟。
11. 5,000 rpm离心1分钟，用5 mL YPD培养基悬浮沉淀。
12. 30℃培养6小时~过夜。
13. 5,000~10,000 rpm离心，用1-10 mL 0.9% NaCl悬浮沉淀。
14. 在YPD选择培养基平板（含一定浓度的AbA，依菌株类型而定）上接种100 µL细胞悬液。30℃培养3-4天后转化完成。
15. 挑取阳性转化子，和/或测定转化效率（以每微克质粒DNA转化的菌落数来表示）。
注意事项
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本产品仅用于科研用途，禁止用于人身上。
3. AbA的最佳工作浓度因宿主细胞不同而有差异，可根据低抑菌浓度(MIC)来确定。
使用浓度
【具体使用浓度请参考相关文献，并根据自身实验条件（如实验目的，细胞种类，培养特性等）进行摸索和优化。】
使用方法（数据来自于公开发表的文献，仅供参考）
细胞实验（体外实验）
Aureobasidin A通过神经酰胺毒性和必需肌醇磷酸化神经酰胺的抑制而抑制酵母细胞的生长。[1]
利用合适的酶切位点将所有DNA片段克隆到Y1H载体pAbAi中，根据酵母转化系统2手册(Clontech, Mountain View, USA)，将构建好的pAbAi用BstbI线性化，转化到酿酒酵母Y1HGold菌株。携带目的DNA片段的克隆在添加了Aureobasidin A (浓度为100-900 ng/mL)的合成脱落培养基上成功进行筛选。[2]
将SlBES1基因的开放阅读框(ORFs)扩增并连接到pGBKT7-GAL4BD质粒中， 将融合蛋白GAL4BD-SlBES1转化至Y2H金酵母细胞中，SD/−Trp培养基用于培养酵母转化，用X-α-gal鉴定转化子α-半乳糖苷酶活性，用Aureobasidin A筛选AUR1-C的基因表达。[3]
客户使用本产品发表的文献
研究中使用的载体pAbAi含有报告基因Ura3和对Aureobasidin A (AbA)耐药的选择性基因AUR1-C，将目标序列F16、F20或F73分别插入到AUR1-C基因上游的多个克隆位点。为了避免酵母内源转录因子与目标顺式元件相互作用的干扰，事先确定用于单个酵母菌落择的低AbA浓度。将3种酵母和含p53-AbAi阳性对照分别悬浮在0.9% NaCl中，OD600调整为0.005。随后，将100μL样品涂于含0、100、200、500和1000 ng/mL AbA的SD/-Ura固体介质(Yeasen Co., China)表面。将平板倒置，在30℃下培养3-5天，AbA的适宜浓度为500 ng/mL。[4]
图1 GmWRKY31蛋白与含有F16、F20、F73、delF16、delF20或delF73片段的酵母菌互作
参考文献
[1] Vanessa Cerantola, et al. Aureobasidin A arrests growth of yeast cells through both ceramide intoxication and deprivation of essential inositolphosphorylceramides. Mol Microbiol. 2009 Mar;71(6):1523-37.
[2] Gong P, Song C, et al. Physalis floridana CRABS CLAW mediates neofunctionalization of GLOBOSA genes in carpel development. J Exp Bot. 2021 Oct 26;72(20):6882-6903.
[3] Su D, Xiang W, Wen L, et al. Genome-wide identification, characterization and expression analysis of BES1 gene family in tomato. BMC Plant Biol. 2021;21(1):161.
[4] Dong H, Tan J, Li M, Yu Y, Jia S, Zhang C, Wu Y, Liu Y. Transcriptome analysis of soybean WRKY TFs in response to Peronospora manshurica infection. Genomics. 2019 Dec;111(6):1412-1422. doi: 10.1016/j.ygeno.2018.09.014. Epub 2018 Sep 27. PMID: 30267765.
HB220421
