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动物组织匀浆制备实验

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应用领域:医疗卫生,生物产业
伊莱博生物科技(上海)有限公司

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免疫学;ELISA试剂盒,抗体,生化试剂,相关试剂。原代细胞,传代细胞,及培养试剂

伊莱博生物科技(上海)有限公司,公司总部位于上海长江软件园。2024年1月与上海大学医学院成立联合研究中心,主要以生命科学研究为基础,专注于研究成果转化及技术服务创新,建立了包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学以及动物实验等学科的研究服务体系,为医学领域的发展做出了重要贡献。


目前已建成并投入使用的实验室面积近2800平方米,包含基础实验平台、组学实验平台以及动物实验平台,基本能够满足科研课题研究的全流程。


伊莱博生物拥有专业的技术支持和实验操作人员团队,核心成员来自中科院、复旦、交大、同济等国内重点高校及科研机构,能够提供前沿的、完善的实验技术咨询与服务。


为了响应国家大力发展基础研究的号召,推动实验科学领域的进步,伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势,为广大科研工作者提供实验技术培训服务,从理论和实操两个部分,培养其科研思维以及解决问题的能力,为今后的科研工作奠定坚实的基础。








详细信息

1、取组织块(0.2g 1g)少可到2~5mg,在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称
重,放入5或10m1的小烧杯内
2、用移液管量取预冷的匀浆介质或者用0. 86%冷生理盐水,匀浆1 )质或生理盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍,用移液管或移液器取总量的2/3的匀浆^质或生理盐水于烧杯中,用眼科小剪尽快剪碎组织块(天然时操作要在冰水浴中进行,将盛有组织的小烧杯放入冰水中)。

3、匀浆的方式有多种:手工匀浆、机器匀浆、超声匀浆、反复冻融。
手工匀浆:将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块,一起倒入匀浆管中进行匀浆,左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟) ,充分研碎,使组织匀浆化。
机器匀浆:用组织捣碎机10000~ 15000r /min上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆
机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行) ,皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎,可用Soniprep150型超声 波发生器以振幅14微米超声处理30秒
使细胞破碎,也可用国产超声波发生仪,用40安培,5秒/次,间隙10秒反复3~5次。反复冻融:培养或者分离的细胞可以用以上的方法匀浆,也可以反复冻溶3次左右(即让细胞加适量的低渗液或者双蒸水放低温冰箱中结冰,溶解,再结冰,再溶解,反复3次左右) ,但有部分酶活力会受影响。取少量组织匀浆做涂片(直接涂片、染色均可),显微镜下观察细胞是否磨破,若没有破则可以延长匀浆时间或增加冻融次数。
4、将制备好的10%匀浆用普通离心机或低温低速离心机3000r /min左右离心10~15分钟,若检测
ATP酶,则只需要1000转/分,离心5分钟,将离心好的匀浆留下,上清弃下面沉淀。



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